北京大学学报(医学版) ›› 2018, Vol. 50 ›› Issue (2): 318-325. doi: 10.3969/j.issn.1671-167X.2018.02.019
朱燕1,石永进2,赵玉亮1,朱平2△
ZHU Yan1,SHI Yong-jin2,ZHAO Yu-liang1, ZHU Ping2△
摘要: 目的:分析常用化疗药物对免疫识别乳腺癌细胞重要的靶标主要组织相容性复合体Ⅰ类相关分子A和B(major histocompatibility complex class Ⅰ-related chain A and B,MICA/B)的影响,探讨其调节MICA/B表达的分子机制。方法:用荧光定量RT-PCR法检测化疗药物对乳腺癌细胞MICA和MICB mRNA表达的影响,流式细胞术检测化疗药物对MICA/B表面蛋白表达的作用。加入咖啡因抑制毛细血管扩张性共济失调突变和Rad3相关激酶(ataxia telangiectasia mutated and Rad3related kinase,ATM/ATR),加入吡咯烷二硫氨基甲酸酯(pynolidine dithiocarbamate,PDTC)抑制核因子κB(nuclear factor κB,NF-κB),观察其是否能够抑制化疗药物中拓扑异构酶抑制剂对乳腺癌细胞MICA和MICB mRNA及蛋白的表达。凝胶阻滞实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测药物是否影响乳腺癌细胞NF-κB与MICA/B启动子区的结合。结果:三种拓扑异构酶抑制剂足叶乙甙、拓扑替康和阿霉素可使乳腺癌MCF-7细胞的MICA和MICB mRNA水平升高。足叶乙甙在浓度为5、20、100 μmol/L时,与不加药处理组相比,MICA mRNA水平分别升高到(1.68±0.17)、 (2.54±0.25)、 (3.42±0.15)倍(P<0.05);MICB mRNA水平分别升高到(1.82±0.24)、(1.56±0.05)、(5.84±0.57)倍(P<0.05)。拓扑替康和阿霉素在特定浓度时也使MCF-7的MICA和MICB mRNA水平显著升高(P<0.05)。拓扑异构酶Ⅱ抑制剂足叶乙甙和拓扑替康处理另一乳腺癌细胞系SK-BR-3后,MICB mRNA的表达也轻度升高(P<0.05)。足叶乙甙和拓扑替康还增加MCF-7细胞表面MICA/B蛋白的表达(P<0.05),且存活和凋亡细胞MICA/B蛋白的表达均增高。用不同浓度的咖啡因处理足叶乙甙损伤的乳腺癌细胞,MICA/B mRNA和蛋白表达均显著降低,当咖啡因浓度为1、 5、 10 mmol/L时,MICA mRNA相对表达水平由不用咖啡因处理组的(3.75±0.25)倍分别降为(0.89±0.05)、(0.81±0.02)、(0.48±0.04)倍(P<0.001),MICB mRNA由(6.85±0.35)倍降为(1.36±0.13)、(0.76±0.06)、(0.56±0.03)倍(P<0.05),MICA/B蛋白表达由(3.42±0.05)倍降为(1.32±0.03)、(1.21±0.06)、(1.14±0.03)倍(P<0.001),表明足叶乙甙对MICA/B的上调作用能够被ATM/ATR抑制剂所抑制。同样,加入不同浓度的NF-κB的强抑制剂PDTC(10、50、100 μmol/L),MICA/B mRNA和蛋白的表达均明显受到抑制(P<0.05),提示NF-κB也参与这一过程。EMSA实验显示,MCF-7细胞用足叶乙甙处理后,NF-κB与MICA/B基因启动子区的结合活性增强。结论:拓扑异构酶抑制剂诱导并上调乳腺癌细胞MICA和MICB mRNA及表面蛋白的表达,表明化疗药物有可能增强免疫系统对乳腺癌的识别和杀伤,ATM/ATR和NF-κB途径参与了这一过程。
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[1] | 朱小玲,李文静,王宪娥,宋文莉,徐莉,张立,冯向辉,路瑞芳,释栋,孟焕新. 细胞色素B-245α链及胆固醇酯转运蛋白基因多态性与广泛型侵袭性牙周炎易感性的关系[J]. 北京大学学报(医学版), 2022, 54(1): 18-22. |
[2] | 范莹莹,刘云,曹烨,谢秋菲. 海马参与雌激素加重咬合干扰致去卵巢大鼠慢性咬肌痛敏[J]. 北京大学学报(医学版), 2022, 54(1): 40-47. |
[3] | 杜文瑜,杨静文,姜婷. 甲磺酸去铁胺促进大鼠颅骨临界骨缺损血管化骨再生的早期连续观察[J]. 北京大学学报(医学版), 2021, 53(6): 1171-1177. |
[4] | 庞泳,张沙,杨华,周柔丽. LAPTM4B-35蛋白作为肝癌血清学诊断新标志物的探讨[J]. 北京大学学报(医学版), 2021, 53(4): 710-715. |
[5] | 马向波,张学武,贾汝琳,高颖,刘洪江,刘玉芳,李英妮. 外周血淋巴细胞亚群检测在系统性硬化症治疗中的应用[J]. 北京大学学报(医学版), 2021, 53(4): 721-727. |
[6] | 冯菁楠,高乐,孙一鑫,杨继春,邓思危,孙凤,詹思延. Xpert®MTB/RIF对我国人群活动性肺结核和利福平耐药肺结核诊断准确性的meta分析[J]. 北京大学学报(医学版), 2021, 53(2): 320-326. |
[7] | 赵世明,杨铁军,许春苗,郭孝峰,马永康,陈学军,李祥,何朝宏. 3.0T磁共振成像在接受过经尿道膀胱肿瘤切除术膀胱癌中诊断肌层浸润的应用[J]. 北京大学学报(医学版), 2020, 52(4): 701-704. |
[8] | 轩艳,蔡宇,王啸轩,石巧,邱立新,栾庆先. 牙龈卟啉单胞菌感染对载脂蛋白e基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响[J]. 北京大学学报(医学版), 2020, 52(4): 743-749. |
[9] | 陈章健,韩硕,郑湃,周淑佩,贾光. 纳米二氧化钛与葡萄糖亚慢性联合经口暴露对幼年大鼠血清叶酸和维生素B12水平的影响[J]. 北京大学学报(医学版), 2020, 52(3): 451-456. |
[10] | 赵磊,张洪宪,侯小飞,刘磊,陆敏,韩永,马潞林. 来氟米特联合羟苯磺酸钙治疗肾移植术后BK病毒相关性肾病[J]. 北京大学学报(医学版), 2020, 52(2): 385-389. |
[11] | 马博,田志华,曲莉,刘月香,张宏,丁慧荣. 索拉菲尼诱导的肝癌耐药细胞株的建立及基因表达分析[J]. 北京大学学报(医学版), 2020, 52(2): 207-213. |
[12] | 宋国红,李惠平,邸立军,严颖,姜晗昉,徐玲,万冬桂,李瑛,王墨培,肖宇,张如艳,冉然,王环. 真实世界吡咯替尼治疗HER2阳性转移性乳腺癌的疗效及安全性[J]. 北京大学学报(医学版), 2020, 52(2): 254-260. |
[13] | 白向松,吕珑薇,周永胜. Tribbles同源蛋白3抑制人脂肪间充质干细胞成脂向分化[J]. 北京大学学报(医学版), 2020, 52(1): 1-9. |
[14] | 田艳,朱军. p53 rs1625895基因多态性与弥漫大B细胞淋巴瘤预后相关性分析[J]. 北京大学学报(医学版), 2019, 51(5): 791-796. |
[15] | 朱学华,杨明钰,夏海缀,何为,张智荧,刘余庆,肖春雷,马潞林,卢剑. 机器学习模型在预测肾结石输尿管软镜碎石术后早期结石清除率中的应用[J]. 北京大学学报(医学版), 2019, 51(4): 653-659. |
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