内皮素反义寡聚脱氧核苷酸抑制肾小球系膜细胞增殖

北京大学学报（医学版） ›› 2001, Vol. 33 ›› Issue (6): 532-535.

内皮素反义寡聚脱氧核苷酸抑制肾小球系膜细胞增殖

李美花,谌贻璞,张志文

^A北京大学第一医院肾内科,北京,100034^B北京大学医学部附属第一医院(北大医院)^C1447^D1%^A北京大学第一医院肾内科,北京,100034;中日友好医院肾内科^B北京大学医学部附属第一医院(北大医院)^C1447^D2%^A北京大学基础医学院生理学系^B北京大学^C1447^D3

出版日期:2001-12-28 发布日期:2001-12-28

Online:2001-12-28 Published:2001-12-28

摘要/Abstract

摘要： 目的:应用反义寡核苷酸技术,对培养的人肾小球系膜细胞(glomerular mesan gial cells, GMC)进行内皮素-1(endothelin,ET-1)基因表达的抑制试验,探讨ET - 1基因表达与GMC增殖效应的关系.方法:以阳离子脂质体lipofectin介导的基因转移方法, 将前内皮素原ppET-1的反义寡聚脱氧核苷酸(a ntisense oligodeoxynucleotide,As-ODN ) 及其对照序列正义寡聚脱氧核苷酸(sense oli godeoxynucleotide,Se-ODN)、错配寡聚脱氧核苷酸(mismatch oligodeoxynucleotide,Mi s-ODN) 分别导入GMC. 通过生物素标记的 As-ODN显色反应,观察寡聚脱氧核苷酸的转移效果;用半定量反转录聚合酶链反应(rever s e transcription-polymerase chain reacti on,RT-PCR)检测寡核苷酸链对GMC的ppET- 1 m RNA表达的影响;用放射免疫分析(radio im munoassay,RIA)观察寡核苷酸链对GMC的ET- 1 蛋白分泌的作用;用氮蓝四唑盐(MTT)试验分析寡核苷酸链对GMC增殖的效应.结果:寡核苷酸链被转移入GMC.10 nmol*L-1 As-ODN抑制了GMC的ppET-1 mRNA表达、ET-1蛋白合成和细胞增殖 (各组P<0 .05).结论:特异抑制GMC的ppET-1基因表达能够抑制其增殖,证实GMC 产生的ET-1能刺激GMC自身的增殖,ET-1是GMC自分泌炎症介质之一.

关键词: 寡聚脱氧核苷酸, 反义/药理学, 内皮缩血管肽类, 肾小球系膜/药物作用

李美花, 谌贻璞, 张志文. 内皮素反义寡聚脱氧核苷酸抑制肾小球系膜细胞增殖[J]. 北京大学学报（医学版）, 2001, 33(6): 532-535.

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