北京大学学报(医学版) ›› 2008, Vol. 40 ›› Issue (6): 572-577.

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PIK3IP1与其新剪切体PIK3IP1-v1均定位于细胞膜并诱导细胞凋亡

高鹏,曾沃坦,邓唯唯,李娜,石太平,马大龙   

  1. (1.国家人类基因组北方研究中心,北京 100176;2.中国科学院研究生院;3.北京大学基础医学院医学免疫学实验室)
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-12-18 发布日期:2008-12-18

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2008-12-18 Published:2008-12-18

摘要: 目的:发现和克隆人类基因PIK3IP1的新变异体并鉴定其功能,研究其对细胞活力的影响和亚细胞定位,分析PIK3IP1在细胞系中的表达情况.方法:利用GenBank中的数据,从人的混合组织cDNA中通过PCR克隆PIK3IP1和它的新剪切体PIK3IP1-v1,运用生物信息学分析其结构特性.经萤光素酶活性检测、细胞形态观察和流式细胞检测研究PIK3IP1和PIK31P1-v1对细胞存活力的影响,使用荧光显微镜观察其亚细胞定位.最后通过RT-PCR分析PIK3IP1在细胞系中的表达情况.结果:获得PIK3IP1和新剪切体PIK3IP1-v1的真核表达质粒和融合绿色荧光蛋白表达质粒.生物信息学分析显示,PIK3IP1和PIK3IP1-v1均有信号肽并包含跨膜结构域,但后者胞外缺失一个Kringle结构域.功能分析发现,PIK3IP1和PIK3IP1-v1均可诱导细胞凋亡.荧光显微观察证实,PIK3IP1的两种剪切体均定位于细胞膜.RT-PCR证明PIK3IP1在多种细胞中转录水平较低.结论:新剪切体PIK3IP1-v1和PIK3IP1均定位于细胞膜并诱导细胞凋亡,而且在多种细胞中低水平转录.

关键词: 1-磷脂酰肌醇3-激酶, 膜蛋白质类, 细胞凋亡, 带舣硫键三环蛋白结构区

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