北京大学学报(医学版) ›› 2011, Vol. 43 ›› Issue (3): 342-347.

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不同修饰多壁碳纳米管诱导的细胞毒性及内质网相关基因表达

郭健1, 聂海瑜2,3, 王海芳3, 贾光1△

  

  1. (1. 北京大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系, 北京100191; 2. 北京大学化学与分子工程学院, 北京100871; 3. 上海大学纳米化学与生物学研究所, 上海200444)
  • 收稿日期:2011-01-17 修回日期:1900-01-01 出版日期:2011-06-18 发布日期:2011-06-18
  • 通讯作者: 贾光

  • Received:2011-01-17 Revised:1900-01-01 Online:2011-06-18 Published:2011-06-18

摘要:

目的:比较表面不同修饰的两种多壁碳纳米管,即羧基化多壁碳纳米管(carboxylic multi-walled carbon nanotubes, c-MWCNTs)和牛磺酸修饰的多壁碳纳米管(taurine-modified multi-walled carbon nanotubes, tau-MWCNTs)对RAW264.7细胞的毒性,初步探究内质网在MWCNTs诱导细胞凋亡中的作用。方法:用尺寸和杂质含量一致的tau-MWCNTs和c-MWCNTs以0、1.56、3.12、6.25、12.50、25.00 μg/cm2剂量染毒RAW264.7细胞3、6、12、24 h,通过WST-1法和AnnexinV-FITC/PI双染,检测细胞毒性和细胞凋亡。应用实时荧光定量PCR技术,检测与内质网钙离子调控、应激和凋亡相关的CRT、GRP78以及CHOP的mRNA表达水平。结果:tau-MWCNTs在所有的染毒剂量和染毒时间内,细胞毒性均比c-MWCNTs低。在≥12.50 μg/cm2剂量下染毒3 h以上,或在≥3.12 μg/cm2剂量下染毒12 h以上,两种MWCNTs均能产生明显的细胞毒性且差异有统计学意义(P<0.05)。凋亡检测发现,两种MWCNTs染毒细胞24 h的细胞凋亡率显著高于12 h,且c-MWCNTs组的凋亡率普遍高于tau-MWCNTs组。实时荧光定量PCR结果显示,在所研究的染毒剂量及时间内,CRT、GRP78和CHOP mRNA表达与对照相比差异很小,无统计学意义。结论:tau-MWCNTs对RAW264.7细胞的毒性较c-MWCNTs明显降低,未观察到MWCNTs对RAW264.7细胞内质网造成损伤,提示内质网通路可能不是MWCNTs导致细胞凋亡的主要机制。


关键词: 纳米管, 碳, 细胞凋亡, 内质网, 基因表达

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