人重组胱天蛋白酶原-3的表达和体外活化

北京大学学报（医学版） ›› 2002, Vol. 34 ›› Issue (4): 316-320.

人重组胱天蛋白酶原-3的表达和体外活化

李现亭,夏东岚,莫晓宁,宋泉声,张颖妹,马大龙

^A北京大学基础医学院免疫学系,北京,100083^B北京大学^C1447

出版日期:2002-08-28 发布日期:2002-08-28

Online:2002-08-28 Published:2002-08-28

摘要/Abstract

摘要： 目的:建立一个在短时间内获取大量活化胱天蛋白酶-3的方法.方法:将胱天蛋白酶-3酶原的基因从真核表达载体中克隆到原核表达载体pMTY4-His中,在大肠杆菌中以包涵体的形式表达MS2-胱天蛋白酶原-3融合蛋白;将包涵体变性,经酸化和浓缩进行体外活化;对所得蛋白用Western blot和活性试验进行鉴定.结果:构建成pMTY4-His-胱天蛋白酶-3原核表达载体,在大肠杆菌中获得了较高水平表达的胱天蛋白酶原-3酶原-MS2融合蛋白.体外活化后每升诱导菌可获得约10 mg蛋白,用抗胱天蛋白酶-3单克隆抗体证实所得蛋白为胱天蛋白酶原-3,活性试验证实得到高活性的蛋白.结论: 成功地建立了大量获取高活性的胱天蛋白酶-3的方法,为深入研究胱天蛋白酶-3的功能和性质提供物质基础.

李现亭, 夏东岚, 莫晓宁, 宋泉声, 张颖妹, 马大龙. 人重组胱天蛋白酶原-3的表达和体外活化[J]. 北京大学学报（医学版）, 2002, 34(4): 316-320.

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