采用十二烷基硫酸钠抑制PCR产物中残留尿苷酶

摘要/Abstract

摘要： 目的:研究抑制PCR产物中残留尿苷酶(uracil DNA glycosylase,UDG)活性的试剂.方法:采用DNA-EIA技术检测在全dU-DNA扩增物中含有稳定剂和不含稳定剂的样品,置室温24 h和37 ℃ 48 h的DNA杂交百分率.结果:(1)在PCR产物中加入稳定剂A液和B液置室温24 h,取5 μl直接杂交,其杂交百分率为61.470%和68.996%,对照组为99.283%.(2)在30 μl PCR产物中加入稳定剂后,并加1×PCR缓冲液稀释至70 μl,置37 ℃ 48 h取10 μl样品杂交,5 μl和2.5 μl A液组杂交百分率为71.092%和67.691%,对照组为68.020%和63.906%.5 μl和2.5 μl B液组杂交百分率为91.333%和80.307%,对照组为63.906%和68.020%.结论:B液可抑制PCR产物残留UDG活性,对保护全dU-PCR产物起重要作用.

关键词: 尿嘧啶DNA糖基化酶, 稳定剂, 基因扩增, 聚合酶链反应

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