北京大学学报（医学版） ›› 2011, Vol. 43 ›› Issue (2): 204-208.
郑启军，汪欣△，胡刚，万远廉，刘玉村，朱静
摘要：
目的： 研究在裸鼠结肠癌肝转移模型中，富含脯氨酸的蛋白酪氨酸激酶2（proline-rich tyrosine kinase 2，Pyk2）对人结肠癌细胞肝转移能力和超微结构的影响。方法：利用正义及反义cDNA技术，在人结肠癌细胞系SW480基础上，构建Pyk2高表达的细胞系SW480-Pyk2+及低表达的细胞系SW480-Pyk2-作为实验组，并以转染空载体的细胞系SW480-vector和原细胞系SW480作为对照组。4组共32只4周龄的Babl/c nu/nu雄性裸鼠，用脾注射保留脾脏法构建裸鼠肝转移瘤模型。6周后处死裸鼠，用Western blot检测瘤细胞中Pyk2蛋白的表达，计数肝转移瘤数目，电子显微镜下观察肝转移瘤细胞的超微结构。结果：6周后裸鼠肝转移模型建立成功，Western blot显示SW480-Pyk2+组的蛋白表达量明显高于空载体组（SW480-vector）和SW480组，SW480-Pyk2-组的蛋白表达量明显低于SW480组和SW480-vector组；肝转移瘤计数显示SW480-Pyk2+组明显少于SW480-vector组及SW480组，SW480-Pyk2-组明显多于SW480-vector组及SW480组（P<0.05），而SW480-vector组与SW480组之间无明显差异；电子显微镜下观察发现，SW480-Pyk2+组细胞连接发育较成熟，有形成腺腔趋势，微绒毛较多，细胞器较多，粗面内质网较多，细胞异型性较轻；而SW480-Pyk2-组细胞连接发育不良，细胞器少，微绒毛短小而稀疏，细胞核异形明显，有核沟。结论：Pyk2能减少结肠癌肝转移灶的数量，改善细胞的异型性和细胞连接发育，并可能通过此机制抑制肿瘤转移。
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