脐带血造血干细胞的采集、浓缩与低温冷冻保存

北京大学学报（医学版） ›› 2003, Vol. 35 ›› Issue (2): 119-122.

脐带血造血干细胞的采集、浓缩与低温冷冻保存

刘开彦,高志勇,姜永军,董文川,李丹,王逸兰,黄宁伟,陆道培

(北京大学人民医院,北京大学血液病研究所,北京 100044)

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2003-04-18 发布日期:2003-04-18

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2003-04-18 Published:2003-04-18

摘要/Abstract

摘要： 目的:探讨脐带血造血干细胞库建立中的脐带血采集、分离、低温冻存的方法.方法:自1997年7月至2000年7月已冻存经过HLA配型的脐带血(cord blood,CB)3 744份.CB采自经检查符合要求的足月顺产或剖宫产新生儿,经(citrate phosphate adenine dextnse, CPD-A)抗凝,用密闭式血袋采集法采集.采集后置于室温保存,18 h内处理.用羟乙基淀粉(hydroxythyl starch, HES)沉降后一次分离方法去除绝大多数红细胞及大部分血浆.采用以二甲亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)为主的冷冻保剂,冷冻保存CB.DMSO的终质量分数为10%.经序控降温后,置于-196 ℃液氮中保存.结果:分析了3 744份冻存CB,平均采集量为(93±22) ml(45～198 ml).浓缩后平均体积为(38±8) ml(30～60 ml);浓缩前后有核细胞数.浓缩前平均有核细胞数为11.2×10⁸±5.3×10⁸(4.5×10⁸～45.1×10⁸);采用HES沉降一次离心浓缩去除红细胞后的平均有核细胞数为9.7×10⁸±4.6×10⁸(3.1×10⁸～30.5×10⁸);平均有核细胞回收率为79%.质控检测40份标本细胞活率为88.2%,CFU-GM回收率和CD34+细胞计数分别为97.6%和86.4%.结论:本研究采用的CB采集、冻存及造血干细胞和病原生物检测的方法是安全有效的.

刘开彦, 高志勇, 姜永军, 董文川, 李丹, 王逸兰, 黄宁伟, 陆道培. 脐带血造血干细胞的采集、浓缩与低温冷冻保存[J]. 北京大学学报（医学版）, 2003, 35(2): 119-122.

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