蚯蚓脱氧核糖核酸酶纯化及酶学性质

北京大学学报（医学版） ›› 2008, Vol. 40 ›› Issue (5): 519-523.

蚯蚓脱氧核糖核酸酶纯化及酶学性质

张建林,刘志贞,王晓媛,姚建强,罗佳,王建华,杨利军,杨琦,牛勃

(1.山西医科大学生物化学与分子生物学系,太原 030001;2.首都儿科研究所;3.山西医科大学科技处;4.中国疾病预防与控制中心)

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-10-18 发布日期:2008-10-18

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2008-10-18 Published:2008-10-18

摘要/Abstract

摘要： 目的:从蚯蚓组织中纯化得到一种脱氧核糖核酸酶(取名为蚯蚓脱氧核糖核酸酶,简称EDNase)并研究其酶学性质.方法:采用丙酮沉淀、离子交换层析、高效液相层析、SDS-PAGE电泳,毛细管等点聚焦电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱等方法.结果:经证实这种纯化方案的纯化倍数是137,酶得率为45.6%.EDNase的相对分子质量约为63 000.Mg2+,Mn2+和ca2+对酶活性有较强的抑制作用,而Na+则轻微的提高酶的活性.在pH 4.4～5.2的范围内EDNase酶活性稳定,其最适pH值为4.8.该酶的最适温度为37℃,在40℃范围内酶具有较高的稳定性.EDNase的等电点为6.20.在以小牛胸腺DNA为底物的条件下,酶的Km为1.52 g/L,Vmax为4.89 mg/(mL·min).该酶可有效降解超螺旋质粒DNA,线状λ-噬菌体DNA和细菌染色体DNA,对RNA未见任何降解作用.结论:这种酶具有独特的酶学性质,不同于以往所知的脱氧核糖核酸酶.

张建林, 刘志贞, 王晓媛, 姚建强, 罗佳, 王建华, 杨利军, 杨琦, 牛勃. 蚯蚓脱氧核糖核酸酶纯化及酶学性质[J]. 北京大学学报（医学版）, 2008, 40(5): 519-523.

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