蚯蚓脱氧核糖核酸酶纯化及酶学性质

北京大学学报（医学版） ›› 2008, Vol. 40 ›› Issue (5): 519-523.

蚯蚓脱氧核糖核酸酶纯化及酶学性质

张建林,刘志贞,王晓媛,姚建强,罗佳,王建华,杨利军,杨琦,牛勃

(1.山西医科大学生物化学与分子生物学系,太原 030001;2.首都儿科研究所;3.山西医科大学科技处;4.中国疾病预防与控制中心)

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-10-18 发布日期:2008-10-18

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2008-10-18 Published:2008-10-18

摘要/Abstract

摘要： 目的:从蚯蚓组织中纯化得到一种脱氧核糖核酸酶(取名为蚯蚓脱氧核糖核酸酶,简称EDNase)并研究其酶学性质.方法:采用丙酮沉淀、离子交换层析、高效液相层析、SDS-PAGE电泳,毛细管等点聚焦电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱等方法.结果:经证实这种纯化方案的纯化倍数是137,酶得率为45.6%.EDNase的相对分子质量约为63 000.Mg2+,Mn2+和ca2+对酶活性有较强的抑制作用,而Na+则轻微的提高酶的活性.在pH 4.4～5.2的范围内EDNase酶活性稳定,其最适pH值为4.8.该酶的最适温度为37℃,在40℃范围内酶具有较高的稳定性.EDNase的等电点为6.20.在以小牛胸腺DNA为底物的条件下,酶的Km为1.52 g/L,Vmax为4.89 mg/(mL·min).该酶可有效降解超螺旋质粒DNA,线状λ-噬菌体DNA和细菌染色体DNA,对RNA未见任何降解作用.结论:这种酶具有独特的酶学性质,不同于以往所知的脱氧核糖核酸酶.

张建林, 刘志贞, 王晓媛, 姚建强, 罗佳, 王建华, 杨利军, 杨琦, 牛勃. 蚯蚓脱氧核糖核酸酶纯化及酶学性质[J]. 北京大学学报（医学版）, 2008, 40(5): 519-523.

参考文献

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[1]	马靖, 裴晓磊, 张扬, 王应. 人PSMP重组蛋白在CHO细胞中表达、纯化及功能鉴定[J]. 北京大学学报（医学版）, 2014, 46(5): 669-675.
[2]	孙昱, 丁怡, 林文翰. 红树植物白骨壤化学成分的分离鉴定[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(2): 221-225.
[3]	李燕, 蒋东东, 金聪, 刘元沨, 陈慰峰. RS21-C6分子的原核表达、纯化、抗体制备及免疫组织化学分析[J]. 北京大学学报（医学版）, 2004, 36(3): 268-271.
[4]	邹坤, 王邠, 赵玉英, 郑俊华, 张如意. 合欢皮中一个新的八糖苷[J]. 北京大学学报（医学版）, 2004, 36(1): 18-20.
[5]	杨秀伟. 天然药物化学发展的历史性变迁[J]. 北京大学学报（医学版）, 2004, 36(1): 9-11.
[6]	辛岗, 赵明辉, 丁焦生, 王海燕. 牛肾小球基底膜Ⅳ型胶原α链非胶原区1的分离纯化及其在抗肾小球基底膜相关疾病中的应用[J]. 北京大学学报（医学版）, 2003, 35(5): 494-498.
[7]	王露, 范慧, 莫晓宁, 张颖妹, 魏征人, 钟英成, 黄大无. 重组凋亡相关蛋白PDCD5的纯化及稳定性[J]. 北京大学学报（医学版）, 2003, 35(4): 360-363.
[8]	佟文勇, 米靓, 梁鸿, 赵玉英. 合欢皮化学成分的分离鉴定[J]. 北京大学学报（医学版）, 2003, 35(2): 180-183.
[9]	陈慰峰. 肝癌肿瘤抗原研究及其应用分析[J]. 北京大学学报（医学版）, 2002, 34(5): 414-417.
[10]	杨东丽, 刘新文, 张宗玉, 童坦君. 人衰老相关DNA片段的筛选及特征分析[J]. 北京大学学报（医学版）, 2002, 34(2): 167-170.
[11]	缑宇轩, 吴希如. 热惊厥易感大鼠P77PMC脑组织核提取物热休克元件结合的特性[J]. 北京大学学报（医学版）, 2001, 33(5): 476-477.
[12]	王伟, 陈伟, 陈虎彪, 刘建全, 赵玉英. 红花岩黄芪化学成分研究[J]. 北京大学学报（医学版）, 2001, 33(3): 205-208.
[13]	王素霞, 邹万忠, 张波. 乙型肝炎病毒相关性肾炎肾组织中HBV DNA的原位检测[J]. 北京大学学报（医学版）, 2001, 33(2): 132-135.
[14]	范慧, 莫晓宁, 张颖妹, 杨璐, 宋泉声, 范中玉, 马大龙. 人重组粒细胞集落刺激因子突变体rhG-CSF-Ala-17的纯化及部分理化性质[J]. 北京大学学报（医学版）, 2000, 32(4): 337-339.
[15]	徐志伟, 邓鸿业, 邓玉兰, 丁桂凤. 系统性红斑狼疮BXSB小鼠骨髓B细胞系细胞的分化发育[J]. 北京大学学报（医学版）, 2000, 32(4): 320-322.

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