摘要：
目的：探索神经元素3(neurogenin 3, NGN3)与成对盒基因4 (paired box gene 4, PAX4)对胰腺十二指肠同源框蛋白1(pancreatic and duodenal homeobox factor 1, PDX1)驱动间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)向胰腺β细胞分化过程中的作用。方法: 构建PDX1基因及NGN3与PAX4双基因表达腺病毒，重组腺病毒Adxsi-CMV-PDX1感染诱导MSCs1周后,再行重组腺病毒Adxsi-CMV-NGN3/CMV-PAX4感染诱导MSCs；分别检测PDX1、PAX4、NGN3、NK转录因子相关的2.2(NK transcription factor related, gene family 2, locus2, NKX2.2)、v-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog B(MafB)、胰岛素(Insulin)、胰高血糖素(Glucagon)多种胰腺分泌细胞相关分子表达情况。结果: 成功构建腺病毒Adxsi-CMV-PDX1与Adxsi-CMV-NGN3/CMV-PAX4；MSCs经Adxsi-CMV-PDX1与Adxsi-CMV-NGN3/CMV-PAX4分步诱导后，免疫细胞化学与间接荧光检测显示PDX1、NGN3与PAX4因子在细胞核内稳定表达；重组腺病毒稳定转染5 d后，细胞开始变圆并集聚成团，用双硫腙(dithizone, DTZ)染色细胞质呈亮红色；细胞经诱导1周后，用RT-PCR检测到神经源分化因子1(neurogenic differentiation 1,NruroD1)与NKX2.2表达，2周后可检测胰岛素/胰岛素原分子；间接荧光检测显示诱导后的细胞先后开始表达NKX2.2、MafB等转录因子与胰岛素/胰岛素原、胰高血糖等胰岛分泌细胞相关分子，但未能检测到v-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A(MafA)与C肽分子表达。结论: NGN3与PAX4对PDX1诱导间充质干细胞向胰腺分泌细胞分化具有促进作用。
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