类风湿关节炎滑膜细胞中白三烯B4诱导肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1βmRNA表达的测定

北京大学学报（医学版） ›› 2006, Vol. 38 ›› Issue (5): 533-536.

类风湿关节炎滑膜细胞中白三烯B4诱导肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1βmRNA表达的测定

陈占昆,吕厚山

(北京大学人民医院关节病研究中心,北京 100044)

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2006-10-18 发布日期:2006-10-18

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2006-10-18 Published:2006-10-18

摘要/Abstract

摘要： 目的:探讨类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)滑膜细胞中白三烯B4(LTB4)诱导肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)mRNA表达的定量测定方法.方法:RA患者的滑膜细胞进行原代培养,加入外源性LTB4或者在LIT存在的情况下,分别加入MK-886(5-脂氧合酶激动蛋白抑制剂)和苯丁抑制素(Bestatin,LTA4水解酶抑制剂),采用TaqMan PCR来定量检测滑膜细胞中TNF-α和IL-1β mRNA水平的表达.结果:原代培养的RA滑膜细胞的基本TNF-α和IL-1β mRNA表达水平(TNF-α/GAPDH和IL-1β/GAPDH),分别为0.02±0.00和0.16±0.01.当加入外源性的LTB4 10^-9和10^-8 mol/L后,LTB4 10^-9 mol/L使TNF-α RNA水平的表达增高了7倍,LTB4 10^-8 mol/L使TNF-α mRNA水平的表达增高了15倍,LTB4 10^-8 mol/L使IL-1β mRNA水平增高了1倍.而加入LIT刺激内源性的LTB4增高后,使TNF-α和IL-1β mRNA水平分别增高了145倍和12倍.在LIT存在的情况下,加入LTB4合成抑制剂MK-886(1 μmol/L,10 μmol/L)后,使TNF-α mRNA水平的表达分别下降15%和66%,IL-1βm RNA水平的表达分别下降了41%和71% . 1100 mg/L 苯丁抑制剂使TNF-α和IL-1β mRNA水平表达分别降低了86%和79%.结论:RA滑膜细胞中LTB4可诱导TNF-α和IL-1β mRNA水平的表达,并有助于定量测定mRNA表达水平.

关键词: 白三烯B4, 肿瘤坏死因子α, 白细胞介素1, 关节炎, 类风湿, 聚合酶链反应

陈占昆, 吕厚山. 类风湿关节炎滑膜细胞中白三烯B4诱导肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1βmRNA表达的测定[J]. 北京大学学报（医学版）, 2006, 38(5): 533-536.

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