人重组粒细胞集落刺激因子突变体rhG-CSF-Ala-17的纯化及部分理化性质

北京大学学报（医学版） ›› 2000, Vol. 32 ›› Issue (4): 337-339.

人重组粒细胞集落刺激因子突变体rhG-CSF-Ala-17的纯化及部分理化性质

范慧,莫晓宁,张颖妹,杨璐,宋泉声,范中玉,马大龙

^A北京大学基础医学院免疫学系,北京,100083^B北京大学^C1447

出版日期:2000-08-28 发布日期:2000-08-28

Online:2000-08-28 Published:2000-08-28

摘要/Abstract

摘要： 目的:建立高效简便的人重组粒细胞集落刺激因子突变体rhG-CSF-Ala-17纯化工艺,并对其进行鉴定.方法:大肠杆菌表达的rhG-CSF-Ala-17经包涵体洗涤、变性复性后,采用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和Superdex75凝胶过滤层析分离纯化.经SDS-PAGE和FPLC检测纯度,并进行N端氨基酸序列分析、比活性分析、紫外最大吸收光谱分析、内毒素检测等指标对其进行鉴定.结果:纯化后的rhG-CSF-Ala-17纯度可达99.64%,比活为1×108 U*mg-1.其N端19个氨基酸分析与预期序列一致,紫外最大吸收光谱位于280 nm,氨基酸的组成与预期结果一致,内毒素含量低于部颁标准.结论:两步层析即可获得高纯度的rhG-CSF-Ala-17重组蛋白质,为进一步的rhG-CSF-Ala-17临床前和临床研究打下了基础.

关键词: 点突变, 大肠杆菌, 粒细胞集落刺激因子/分离和提纯, rhG-CSF-Ala-17

范慧, 莫晓宁, 张颖妹, 杨璐, 宋泉声, 范中玉, 马大龙. 人重组粒细胞集落刺激因子突变体rhG-CSF-Ala-17的纯化及部分理化性质[J]. 北京大学学报（医学版）, 2000, 32(4): 337-339.

参考文献

相关文章 8

[1]	张宽根,周雨禾,邵雅昆,梅放,由江峰,刘北英,裴斐. 肿瘤转移抑制基因LASS2/TMSG1 S248A突变体通过增加ATP6V0C表达促进前列腺癌的侵袭[J]. 北京大学学报（医学版）, 2019, 51(2): 210-220.
[2]	陈伶利, 李杰, 张晓青, 宋岚, 钱纯, 葛金文. 以大肠埃希菌tolC蛋白为靶标的适配体的筛选及结构分析[J]. 北京大学学报（医学版）, 2014, 46(5): 698-702.
[3]	李伟军, 邢晓芳, 曲立科, 孟麟, 寿成超. PRL-3基因C104S位点突变体和CAAX缺失体的构建及表达[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(5): 516-520.
[4]	王鹏远, 刘玉村, 赵敏, 孙丽颖, 罗文毅, 高红桥, 万远廉. 外科监护室耐药大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌产超广谱β-内酰胺酶的基因型研究[J]. 北京大学学报（医学版）, 2004, 36(6): 637-641.
[5]	柯杨. 肿瘤的遗传方式及基本研究策略[J]. 北京大学学报（医学版）, 2001, 33(5): 385-388.
[6]	狄春辉, 施群, 张颖妹, 赵辰, 钟英成, 黄大无, 马大龙. 人重组钙依赖性磷脂结合蛋白Ⅴ在大肠杆菌中的高效表达、纯化及细胞凋亡检测[J]. 北京大学学报（医学版）, 2001, 33(2): 167-169.
[7]	狄春辉, 钟英成, 施群. 人心肌肌钙蛋白Ⅰ在大肠杆菌中的高效表达及纯化[J]. 北京大学学报（医学版）, 2000, 32(4): 351-353.
[8]	曹志敏, 张颖妹, 陈英玉, 马大龙. 人TFAR19的定点突变及其重组蛋白的表达、纯化和功能分析[J]. 北京大学学报（医学版）, 2000, 32(4): 306-309.

Metrics

Viewed

Full text

Abstract

Cited

Shared

Discussed

本文评价

推荐阅读 10

[1]	田增民, 陈涛, Nanbert ZHONG, 李志超, 尹丰, 刘爽. 神经干细胞移植治疗遗传性小脑萎缩的临床研究（英文稿）[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(4): 456 -458 .
[2]	郭岩, 谢铮. 用一代人时间弥合差距——健康社会决定因素理论及其国际经验[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(2): 125 -128 .
[3]	成刚, 钱振华, 胡军. 艾滋病项目自愿咨询检测的技术效率分析[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(2): 135 -140 .
[4]	卢恬, 朱晓辉, 柳世庆, 郑杰, 邱晓彦. 白细胞介素2促进宫颈癌细胞系HeLaS3免疫球蛋白G的表达[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(2): 158 -161 .
[5]	袁惠燕, 张苑, 范田园. 离子交换型栓塞微球及其载平阳霉素的制备与性质研究[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(2): 217 -220 .
[6]	徐莉, 孟焕新, 张立, 陈智滨, 冯向辉, 释栋. 侵袭性牙周炎患者血清中抗牙龈卟啉单胞菌的IgG抗体水平的研究[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(1): 52 -55 .
[7]	祁琨, 邓芙蓉, 郭新彪. 纳米二氧化钛颗粒对人肺成纤维细胞缝隙连接通讯的影响[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(3): 297 -301 .
[8]	李宏亮, 安卫红, 赵扬玉, 朱曦. 妊娠合并高脂血症性胰腺炎行血液净化治疗1例[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(5): 599 -601 .
[9]	李伟军, 邢晓芳, 曲立科, 孟麟, 寿成超. PRL-3基因C104S位点突变体和CAAX缺失体的构建及表达[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(5): 516 -520 .
[10]	丰雷, 王玉凤, 曹庆久. 哌甲酯对注意缺陷多动障碍儿童平衡功能影响的开放性研究[J]. 北京大学学报（医学版）, 2007, 39(3): 304 -309 .