小鼠Collectrin正反义真核表达载体的构建及其功能

北京大学学报（医学版） ›› 2004, Vol. 36 ›› Issue (2): 181-184.

小鼠Collectrin正反义真核表达载体的构建及其功能

张宏,王湘玲,张艳玲,侯平,李寒,王海燕

(北京大学第一医院肾内科,北京大学肾脏疾病研究所,北京 100034)

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2004-04-18 发布日期:2004-04-18

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2004-04-18 Published:2004-04-18

摘要/Abstract

摘要： 目的:构建新基因Collectrin的正反义真核表达载体,研究其与细胞生长的关系.方法:以PCR的方法扩增Collectrin的开放阅读框序列,与载体pcDNA3.1/V5-His相连构成融合基因表达质粒.将重组后的质粒进行细菌转化,质粒扩增、纯化后,测序鉴定Collectrin的正义及反义序列.以脂质体介导的方法体外转染肾皮质集合管细胞系(M-1).以β-Gal staining的方法测定转染效率.分别行逆转录-PCR和Western blot,检测不同融合基因转染后细胞Collectrin mRNA和蛋白水平的表达变化.以四甲基偶氮唑蓝(MTF)参入法分别在第24小时、第48小时测定不同融合基因转染后细胞增殖活性.结果:M-1细胞在融合基因转染第24小时转染效率最高.Collectrin正义转染组较反义、空载体和正常对照组在核酸和蛋白水平表达量都显著增高,Collectrin反义转染组蛋白表达较其他组明显下调.反义转染组细胞较其他组明显减少.结论:成功构建了Collectrin正义及反义真核表达载体,Collectrin是维持细胞生长存活的重要元件.

关键词: Collectrin, 基因表达, 肾小管, 集合, 细胞分裂

张宏, 王湘玲, 张艳玲, 侯平, 李寒, 王海燕. 小鼠Collectrin正反义真核表达载体的构建及其功能[J]. 北京大学学报（医学版）, 2004, 36(2): 181-184.

参考文献

相关文章 15

[1]	周川, 马雪, 邢云昆, 李璐迪, 陈洁, 姚碧云, 傅娟玲, 赵鹏. 基于肿瘤基因组图谱数据库探索性筛选潜在泛癌生物标志物[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(3): 602-607.
[2]	赵亮,孙丽芳,郑秀丽,刘静芳,郑蓉,王颖,杨蕊,张蕾,于丽,张晗. 体外受精-胚胎移植对早期胎盘黏着斑激酶信号通路的影响[J]. 北京大学学报（医学版）, 2019, 51(1): 151-158.
[3]	张晓威，兰轲，杨文博，李清，赵永平，殷华奇，Kite Brandes，白文俊，徐涛. 跨膜蛋白CMTM2在人睾丸和精子中的表达及定位[J]. 北京大学学报(医学版), 2017, 49(4): 575-579.
[4]	杨光，程庆砾，李春霖，贾雅丽，岳文，裴雪涛，刘洋，赵佳慧，杜婧，敖强国. 高糖减弱肾组织干细胞条件培养液对缺氧损伤肾小管上皮细胞的修复作用[J]. 北京大学学报(医学版), 2017, 49(1): 125-130.
[5]	郭倩，陈绪勇，苏茵. 白细胞介素2信号通路相关分子与系统性红斑狼疮[J]. 北京大学学报(医学版), 2016, 48(6): 1100-1104.
[6]	马靖, 裴晓磊, 张扬, 王应. 人PSMP重组蛋白在CHO细胞中表达、纯化及功能鉴定[J]. 北京大学学报（医学版）, 2014, 46(5): 669-675.
[7]	温静，程庆砾，马强，齐云，赵佳慧，杜婧，王小丹，刘胜，李美花，张晓英. 肾组织干细胞对人肾小管上皮细胞损伤修复的作用[J]. 北京大学学报（医学版）, 2013, 45(4): 619-.
[8]	李常虹, 孙琳, 张颖健, 赵金霞, 姚中强, 徐宁, 刘蕊, 刘湘源. 半乳糖凝集素在脐带间充质干细胞中的表达[J]. 北京大学学报（医学版）, 2013, 45(03): 452-457.
[9]	崔素萍, 王花丽, 彭伟, 刘海静, 侯琳, 张波. 乳腺癌组织P16异常表达的相关分析[J]. 北京大学学报（医学版）, 2012, 44(5): 755-759.
[10]	张驰. 成骨细胞特异性转录因子Osterix对骨形成作用的分子机制[J]. 北京大学学报（医学版）, 2012, 44(5): 659-665.
[11]	郭健, 聂海瑜, 王海芳, 贾光. 不同修饰多壁碳纳米管诱导的细胞毒性及内质网相关基因表达[J]. 北京大学学报（医学版）, 2011, 43(3): 342-347.
[12]	邓暄, 赵红珊, 彭智, 邓唯唯, 李娜, 郭帅, 石太平. C17orf62诱导细胞死亡的作用及其机制[J]. 北京大学学报（医学版）, 2011, 43(2): 168-172.
[13]	王晓慧, 雷军强, 彭芝兰, 杨永秀. △Np63基因表达与卵巢癌生物学行为的关系[J]. 北京大学学报（医学版）, 2011, 43(2): 304-306.
[14]	于澄钒, 黄晓波, 陈亮, 许清泉, 胡卫国, 王晓峰. 纳米细菌对肾小管上皮细胞的损伤及晶体滞留的影响[J]. 北京大学学报（医学版）, 2010, 42(4): 436-442.
[15]	张育军, 何湘君, 刘玉京, 张旗. MicroRNAs在唐氏综合征模型小鼠海马中的异常表达[J]. 北京大学学报（医学版）, 2010, 42(2): 173-178.

Metrics

Viewed

Full text

Abstract

Cited

Shared

Discussed

本文评价

推荐阅读 10

[1]	卢恬, 朱晓辉, 柳世庆, 郑杰, 邱晓彦. 白细胞介素2促进宫颈癌细胞系HeLaS3免疫球蛋白G的表达[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(2): 158 -161 .
[2]	Jian-wei GU, Emily YOUNG, Zhi-jun PAN, Kevan B. TUCKER, Megan SHPARAGO, Min HUANG, Amelia Purser BAILEY. SD大鼠长期高盐饮食可导致其高血压并改变肾细胞因子基因表达谱[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(5): 505 -515 .
[3]	丰雷, 王玉凤, 曹庆久. 哌甲酯对注意缺陷多动障碍儿童平衡功能影响的开放性研究[J]. 北京大学学报（医学版）, 2007, 39(3): 304 -309 .
[4]	刘津, 王玉凤. 父母培训对共患对立违抗性障碍的注意缺陷多动障碍的作用[J]. 北京大学学报（医学版）, 2007, 39(3): 310 -314 .
[5]	马明信. 重视并提高疑难/罕见淋巴瘤的诊治[J]. 北京大学学报（医学版）, 2007, 39(4): 342 .
[6]	徐涛, 赵卫红, 王晓峰, 黄晓波, 许清泉, 杨波, 叶雄俊. 盆腔脂肪增多症两例兄弟患者报道及文献分析[J]. 北京大学学报（医学版）, 2007, 39(4): 355 -360 .
[7]	田雨, 刘建湘, 王化虹. 经皮肝穿刺活检确诊无症状原发性肝结核一例[J]. 北京大学学报（医学版）, 2007, 39(4): 365 -368 .
[8]	吴红花, 高燕明, 郭晓蕙. 以上消化道出血为主诉的原发性甲状旁腺功能亢进症一例[J]. 北京大学学报（医学版）, 2007, 39(4): 374 -376 .
[9]	李淳德, 李宏, 刘宪义. 后路脊柱截骨矫形治疗重度僵硬后凸型脊柱侧凸[J]. 北京大学学报（医学版）, 2007, 39(4): 399 -402 .
[10]	袁葛, 赵继宗, 王硕, 许俊, 辛宇. 术中血管造影在脑动静脉畸形手术中的应用[J]. 北京大学学报（医学版）, 2007, 39(4): 412 -415 .