北京大学学报（医学版） ›› 2006, Vol. 38 ›› Issue (6): 623-627.
曲华毅,郭卫,何湘君
摘要： 目的:构建尤文肉瘤融合基因EWS-FLI1重组腺病毒,利用此腺病毒感染外周血单核细胞(PBMC),培养树突细胞(DC),检测感染后的DC致敏的淋巴细胞对尤文肉瘤细胞系的杀伤作用.方法:将质粒Pec1/ EWS-FLI1酶切,切出的EWS-FLI1 cDNA片段克隆至腺病毒穿梭质粒padtrack-cmv的hCMV启动子下游.将穿梭质粒和骨架质粒共同转化大肠杆菌BJ5183菌株,获得同源重组后的腺病毒质粒pADeasy-1/ EWS-FLI1.将此质粒转染293细胞,包装产生腺病毒Ad EWS-FLI1.扩增、纯化产生高滴度的Ad EWS-FLI1.转染PBMC并经过鉴定后致敏淋巴细胞,4 h 51Cr释放试验测定致敏后的淋巴细胞对尤文肉瘤细胞系的杀伤作用.结果: 同源重组后产生的pADeasy-1/ EWS-FLI1经PCR鉴定构建成功,纯化后的滴度为4×1010/mL.转染PBMC后,RT-PCR证实有EWS-FLI1 mRNA的转录.致敏后的淋巴细胞对尤文肉瘤细胞系有明显的杀伤作用,效靶比在40:1时,对尤文肉瘤673细胞系的杀伤率为35.1800%±0.0128%,和对照组相比差异有统计学意义. 结论 :重组腺病毒Ad EWS-FLI1构建成功,并能在PBMC中稳定有效地表达,Ad EWS-FLI1转染的DC可高效地诱发机体T细胞的特异性抗肿瘤免疫应答作用.
| [1] | 王滨帅,邱敏,张前进,田茂锋,刘磊,王国良,陆敏,田晓军,张树栋. 6例肾尤文肉瘤伴静脉瘤栓的诊治[J]. 北京大学学报（医学版）, 2024, 56(4): 636-639. |
| [2] | 金银姬,孙琳,赵金霞,刘湘源. 血清IgA型抗鼠科肉瘤病毒癌基因同源物B1抗体在类风湿关节炎中的意义[J]. 北京大学学报（医学版）, 2023, 55(4): 631-635. |
| [3] | 王微,李鑫,柳萍,董颖. 荧光原位杂交检测MDM2和DDIT3基因信号改变在诊断脂肪肉瘤中的价值[J]. 北京大学学报（医学版）, 2023, 55(2): 228-233. |
| [4] | 农琳,王微,梁丽,李东,李鑫,李挺. 母细胞性浆样树突细胞肿瘤13例临床病理学特征[J]. 北京大学学报（医学版）, 2023, 55(2): 308-314. |
| [5] | 叶剑飞,赵磊,王国良,洪锴,马潞林. 睾丸横纹肌肉瘤的诊治分析[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(6): 1178-1182. |
| [6] | 毕海,黄毅,马潞林,陆敏,张树栋,张洪宪. 3例肾尤文肉瘤合并下腔静脉癌栓的诊治[J]. 北京大学学报（医学版）, 2020, 52(5): 985-989. |
| [7] | 李军,牛占岳,薛艳,石雪迎,张波,王媛. 重度溃疡性结肠炎合并卡波西肉瘤1例并文献综述[J]. 北京大学学报（医学版）, 2020, 52(2): 373-377. |
| [8] | 林国中,王振宇,刘彬,杨邵敏. 腺泡状横纹肌肉瘤椎管内转移1例[J]. 北京大学学报（医学版）, 2019, 51(6): 1165-1168. |
| [9] | 张帆,燕太强,郭卫. Rasfonin抑制骨肉瘤细胞143B的增殖和迁移[J]. 北京大学学报（医学版）, 2019, 51(2): 234-238. |
| [10] | 梅放，赵婷婷，高菲，郑杰. 肺罕见良性双相分化性肿瘤——肺腺纤维瘤1例并文献复习[J]. 北京大学学报(医学版), 2017, 49(6): 1076-1080. |
| [11] | 刘畅, 崔立刚, 王宏磊. 肾尤文氏肉瘤/原始神经外胚层肿瘤: 1例报道并文献复习[J]. 北京大学学报(医学版), 2017, 49(5): 919-923. |
| [12] | 金银姬，赵金霞，孙琳，杨麟，邢瑞，刘湘源. 血清鼠科肉瘤病毒癌基因同源物B1蛋白的检测与类风湿关节炎[J]. 北京大学学报(医学版), 2016, 48(6): 947-950. |
| [13] | 肖宗宇, 陈晓娟, 杨艺, 徐如祥. 肿瘤干细胞样细胞RNA致敏树突状细胞治疗大鼠9L脑肿瘤[J]. 北京大学学报(医学版), 2015, 47(4): 661-666. |
| [14] | 唐顺, 郭卫, 杨荣利, 汤小东, 李大森, 董森. 40岁以上成年骨肉瘤患者的外科治疗及预后因素[J]. 北京大学学报（医学版）, 2015, 47(1): 165-169. |
| [15] | 林健，张小平，黄炳伟 ，李森，韩文科，周利群，何群，李昕. 17例原发性肾肉瘤回顾性分析[J]. 北京大学学报（医学版）, 2013, 45(4): 554-. |
|
||
