抑制X染色体连锁的凋亡抑制蛋白(XIAP)和Survivin表达对胰腺癌Panc-1细胞增殖及化疗敏感性的影响

摘要/Abstract

摘要： 目的：探讨同时抑制X染色体连锁的凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein, XIAP)和Survivin表达，对胰腺癌Panc-1细胞增殖及吉西他滨（Gem）化疗敏感性的影响，并与单独抑制XIAP或Survivin表达的策略进行对比。方法：运用前期实验构建的XIAP-shRNA慢病毒（LV-X）和Survivin-shRNA慢病毒（LV-S），分别建立XIAP和/或Survivin表达稳定抑制的胰腺癌Panc-1细胞株，即Panc-1-X、Panc-1-S和Panc-1-XS。运用Real-time PCR和半定量Western blot分别检测XIAP和Survivin的mRNA和蛋白的表达情况，以细胞计数法及克隆形成实验检测细胞增殖能力，Caspase-3/7试剂盒及流式细胞仪检测细胞凋亡，MTT法检测细胞对Gem的化疗敏感性。结果：成功建立了XIAP和/或Survivin表达稳定抑制的胰腺癌细胞株Panc-1。XIAP和Survivin同时稳定抑制后，Panc-1的增殖能力显著受到抑制，Panc-1-XS组的克隆形成率为10.12%±1.33%，显著低于对照组Panc-1-XncSnc组(96.61%±7.89%)和Panc-1组(100.28%±8.97%, P<0.05)。用0.5 mg/L Gem处理24 h后，Panc-1-XS组的Caspase-3/7相对活性明显升高至15.02±0.57，显著高于Panc-1组与Panc-1-XncSnc组（分别为8.87±0.19和9.05±0.23，P<0.05）；Panc-1-XS组的细胞凋亡率为24.09%±2.75%，显著高于对照组Panc-1-XncSnc及Panc-1组（分别为12.09%±1.97%和12.06%±1.22%，P<0.05）。Panc-1-XS组的IC50值为(0.47±0.04) mg/L，显著低于对照组Panc-1-XncSnc的(2.18±0.13) mg/L及Panc-1组的(2.13±0.18) mg/L (P<0.05)，对Gem的化疗敏感性显著增强。进一步检测显示，Panc-1-XS组的IC50值为(0.47±0.04) mg/L，均显著低于Panc-1-X组的(0.76±0.07) mg/L和Panc-1-S组的(0.87±0.09) mg/L (P<0.05)。结论：同时稳定抑制胰腺癌细胞株Panc-1中XIAP和Survivin的表达，能显著抑制Panc-1细胞增殖能力，增强其Gem化疗敏感性，并明显优于XIAP或Survivin表达单独抑制的策略。

关键词: 胰腺肿瘤, 凋亡抑制蛋白质类, 细胞增殖, 药物疗法, 抗药性, 肿瘤

宰红艳, 易小平, 李宜雄, 龙学颖, 曹丽平, 刘慧. 抑制X染色体连锁的凋亡抑制蛋白(XIAP)和Survivin表达对胰腺癌Panc-1细胞增殖及化疗敏感性的影响[J]. 北京大学学报（医学版）, 2013, 45(2): 242-.

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