北京大学学报(医学版) ›› 2009, Vol. 41 ›› Issue (1): 76-79.
周彦秋,林久祥△
摘要: 目的:采用胚胎舌体外培养结合扫描电子显微镜、免疫组织化学方法,探讨骨形成蛋白(bone morphogenetic protein-4, BMP4)对舌体形态发育的影响。方法:分别向标准培养基中添加不同浓度的BMP4及其拮抗剂Noggin,以所加因子及其浓度的不同分为6个实验组, BMP4分为3组,浓度分别为0.03 mg/L, 0.3 mg/L, 1 mg/L; BMP4的拮抗剂Noggin分为3组, 浓度分别为1 mg/L, 3 mg/L, 10 mg/L; 标准培养基培养组为对照组。将解剖获得的大鼠胚胎第13天(embryonic day 13,E13)的胚胎舌在培养基中格栅法培养3 d, 固定后, 用扫描电子显微镜观察记录胚胎舌; 分别测量胚胎舌全长、舌前1/8、舌前1/4和舌体1/2宽度, 统计分析测量结果。胚胎舌内放置经PBS和BMP4(667 mg/L)溶液处理的凝胶颗粒, 以PBS组为对照组, 在标准培养基中培养3 d后, 制成冰冻切片, 检测Ki67的表达。结果:(1)舌形态:舌体长度明显改变(P<0.05), 相对对照组舌体长度(1 037.8±126.2 μm), BMP4各浓度组舌体长度明显变短(0.03 mg/L组877.3±67.6 μm, 0.3 mg/L组838.5±88.9 μm,1 mg/L组718.7±38.6 μm), Noggin各浓度组变化不明显(1 mg/L组1 191.1±75.7 μm , 3 mg/L组1 169.8±108.7 μm, 10 mg/L组1 241.3±17.4 μm); 舌前1/8宽度明显改变(P<0.05), 相对对照组(639.1±106.2 μm), BMP4各浓度组舌前1/8宽度明显变窄(0.03 mg/L组332.1±80.9 μm, 0.3 mg/L组305.1±51.3 μm, 1 mg/L组276.9±45.9 μm), Noggin各浓度组除10 mg/L组外, 舌前1/8宽度加宽(1 mg/L组815.5±90.3 μm, 3 mg/L组857.6±87.1 μm, 10 mg/L组807.1±113.8 μm); 舌前1/4宽度改变明显(P<0.05), 相对对照组(653.7±101.6 μm), BMP4各浓度组舌前1/4宽度明显变窄(0.03 mg/L组421.3±43.8 μm, 0.3 mg/L组407.3±15.6 μm, 1 mg/L组363.7±24.7 μm), 而Noggin各浓度组明显加宽(1 mg/L组838.0±130.5 μm, 3 mg/L组947.2±34.9 μm, 10 mg/L组889.4±74.6 μm); 舌体1/2宽度变化明显(P<0.05), 相对对照组(683.1±79.8 μm), BMP4各浓度组舌体1/2宽度明显变窄(0.03 mg/L组567.3±35.8 μm , 0.3 mg/L组548.4±30.5 μm, 1 mg/L组457.4±48.0 μm), Noggin各浓度组舌体1/2有增宽趋势, 与其他两组比较, 3 mg/L组差异有统计学意义(1 mg/L组776.2±134.1 μm, 3 mg/L组964.3±44.3 μm, 10 mg/L组777.2±46.7 μm)。(2)BMP4凝胶颗粒周围Ki67阳性细胞数量少于对照组。结论:(1)BMP4可影响E13胚胎舌形态发育, 使舌体呈现短、窄、尖的外形; (2)BMP4抑制胚胎舌的细胞增殖。
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