北京大学学报(医学版) ›› 2005, Vol. 37 ›› Issue (5): 485-488.

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鼠抗SARS病毒X4蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

罗昕,张婷,马大龙,陈英玉   

  1. (北京大学人类疾病基因研究中心,北京 100083)
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2005-10-18 发布日期:2005-10-18

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2005-10-18 Published:2005-10-18

摘要: 目的:制备SARS病毒X4蛋白的单克隆抗体,探讨X4蛋白的结构和功能,以及临床应用的价值.方法:以重组SARS病毒X4蛋白为免疫原,免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞进行常规融合, 通过间接ELISA的筛选和有限稀释克隆化,获得鼠抗SARS病毒X4蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过ELISA,Western blot和免疫荧光实验等方法鉴定其特性.结果:成功地建立了3株稳定分泌抗X4蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为8A5,8H6和4A2.3株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类均为IgG2a.通过ELISA, Western blot等方法的鉴定,抗X4蛋白的单克隆抗体能与X4蛋白发生特异性反应.免疫荧光实验的结果表明,X4蛋白的单克隆抗体能与SARS-病毒感染的Vero E6 细胞发生特异性结合.结论:获得了特异性识别SARS病毒X4蛋白的单克隆抗体,为SARS病毒X4蛋白的生物学功能研究奠定了基础.

关键词: 严重急性呼吸综合征, SARS病毒, 抗体, 单克隆

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