北京大学学报(医学版) ›› 2002, Vol. 34 ›› Issue (6): 726-728.

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用限制性内切酶制备T载体

陆哲明,柯杨   

  1. ^A北京大学临床肿瘤学院(北京市肿瘤防治研究所)遗传室,北京,100034^B北京大学^C1447
  • 出版日期:2002-12-28 发布日期:2002-12-28

  • Online:2002-12-28 Published:2002-12-28

摘要: 目的:介绍一种制备T 载体的方法.方法:用限制性内切酶Xcm Ⅰ酶切,在两端产生T末端,制备的T载体可直接用来克隆用Taq DNA 聚合酶产生带A末端的PCR产物.结果:PCR产物直接和T载体连接,用常规氯化钙法制备的感受态菌转化,对转化子提取质粒进行酶切鉴定,证明阳性率达80%.结论:制备T载体过程简单,质量稳定,产量高,并可扩增等优点.

关键词: T 载体, DNA限制酶类, 遗传载体, 基因扩增

[1] 李琼,常志芳,杨国安,庞春艳,王永福. 1型1-磷酸鞘氨醇受体的siRNA对人涎腺导管上皮细胞的作用[J]. 北京大学学报(医学版), 2016, 48(6): 987-993.
[2] 石岩岩, 丁士刚, 张婷, 鲁凤民 , 张静, 王晔. 幽门螺杆菌硫氧还蛋白-1基因克隆及其重组蛋白表达与活性测定[J]. 北京大学学报(医学版), 2014, 46(2): 190-194.
[3] 沈晓婷,徐艳文,钟依平,曾艳红,王静,丁晨晖,邢卫杰,周灿权. 多重置换扩增结合短串联重复序列在植入前遗传学诊断中的应用[J]. 北京大学学报(医学版), 2013, 45(6): 852-858.
[4] 甄秀梅 ,孙义民 ,乔杰,李蓉,王丽娜 ,刘平. 中国卵巢早衰妇女全基因组染色体拷贝数变异分析[J]. 北京大学学报(医学版), 2013, 45(6): 841-847.
[5] 张艳芝, 熊晖, 王小竹, 王硕, 罗静, 王静敏, 姜玉武, 常杏芝, 潘虹, 齐建光, 李万镇, 袁云, 吴希如. 假肥大型进行性肌营养不良患者的基因型、表型分析及随访研究[J]. 北京大学学报(医学版), 2010, 42(6): 661-666.
[6] 李昕, 任军. MDA-MB-453细胞中分离CD44+/CD24-/low和SP细胞及其Wnt和Notch通路状态分析[J]. 北京大学学报(医学版), 2008, 40(5): 471-475.
[7] 巴艳华, 李惠平. 鼠双微粒体2/p53通路与乳腺癌的研究进展[J]. 北京大学学报(医学版), 2006, 38(5): 551-554.
[8] 杨丽君, 郁卫东, 梁蓉, 尚美, 郭静竹. 基因组简并寡核苷酸引物聚合酶链反应的影响因素[J]. 北京大学学报(医学版), 2005, 37(4): 436-439.
[9] 王汉森, 潘虹, 张玉稚, 包新华, 张国荣, 吴希如. 无辅助病毒HSV-1载体介导LacZ基因在培养皮层神经元中的表达[J]. 北京大学学报(医学版), 2005, 37(2): 172-174.
[10] 杜绍财, 张敏, 刘峰, 韩建德, 吴娟, 陶其敏, 冯百芳. 采用十二烷基硫酸钠抑制PCR产物中残留尿苷酶[J]. 北京大学学报(医学版), 2002, 34(6): 729-731.
[11] 邢卉春, 徐小元, 王勤环, 于敏, 公伟波, 斯崇文, 邵一鸣. 趋化因子受体CXCR4反义RNA重组表达载体的构建及其在真核细胞中的表达[J]. 北京大学学报(医学版), 2002, 34(2): 155-158.
[12] 陆纲, 鹿培源, 贾弘. "混合克隆"快速筛选重组体[J]. 北京大学学报(医学版), 2002, 34(1): 86-87.
[13] 马文彬, 冯百芳. 丙型肝炎病毒结构蛋白真核表达载体的构建及其在哺乳动物细胞中的表达[J]. 北京大学学报(医学版), 2001, 33(1): 73-75.
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[1] 张三. 中文标题测试[J]. 北京大学学报(医学版), 2010, 42(1): 1 -10 .
[2] 赵磊, 王天龙 . 右心室舒张末期容量监测用于肝移植术中容量管理的临床研究[J]. 北京大学学报(医学版), 2009, 41(2): 188 -191 .
[3] 万有, , 韩济生, John E. Pintar. 孤啡肽基因敲除小鼠电针镇痛作用增强[J]. 北京大学学报(医学版), 2009, 41(3): 376 -379 .
[4] 张燕, 韩志慧, 钟延丰, 王盛兰, 李玲玲, 郑丹枫. 骨骼肌活组织检查病理诊断技术的改进及应用[J]. 北京大学学报(医学版), 2009, 41(4): 459 -462 .
[5] 丰雷, 程嘉, 王玉凤. 注意缺陷多动障碍儿童的运动协调功能[J]. 北京大学学报(医学版), 2007, 39(3): 333 -336 .
[6] . 书讯[J]. 北京大学学报(医学版), 2007, 39(3): 225 -328 .
[7] 牟向东, 王广发, 刁小莉, 阙呈立. 肺黏膜相关淋巴组织型边缘区B细胞淋巴瘤一例[J]. 北京大学学报(医学版), 2007, 39(4): 346 -350 .
[8] 韩金涛, 赵军, 栾景源, 张龙. 多发结核性腹主动脉瘤一例[J]. 北京大学学报(医学版), 2007, 39(4): 361 -364 .
[9] 燕太强, 杨荣利, 郭卫, 沈丹华. 胫骨平滑肌肉瘤伴全身多发骨转移一例[J]. 北京大学学报(医学版), 2007, 39(4): 369 -373 .
[10] 常杏芝, 卢红梅, 张月华, 秦炯. 以高血压与红斑肢痛为主要表现的汞中毒一例[J]. 北京大学学报(医学版), 2007, 39(4): 377 -380 .