北京大学学报(医学版) ›› 2005, Vol. 37 ›› Issue (2): 195-197.

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抗原修复液pH值及修复时间对免疫组化染色效果的影响

杜娟,石雪迎,郑杰,周敏,崔新   

  1. (北京大学基础医学院病理学系,北京 100083)
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2005-04-18 发布日期:2005-04-18

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2005-04-18 Published:2005-04-18

摘要: 目的:探讨使P504S、P63、CD10 、Ki-67抗原抗体复合物在免疫组化检测中获得高表达的抗原修复条件.方法:取前列腺癌、良性前列腺增生、乳腺增生组织和人乳头状瘤病毒感染的外阴上皮组织,用10%(体积分数)中性缓冲甲醛固定液固定.用EnVision二步法行免疫组化染色, P504S、P63、CD10、 Ki-67分别作为前列腺癌、良性前列腺增生、乳腺增生组织和感染人乳头状瘤病毒的外阴上皮组织的一抗,使用统一的EnVisionTM二抗.每种组织皆分别使用3种不同的缓冲液进行抗原修复:pH 6.0的枸橼酸缓冲液、pH 8.0的乙二氨四乙酸二钠(EDTA)缓冲液和pH 9.0的EDTA-Tris缓冲液.对每一种抗原修复液,应用4个不同的抗原修复时间:12 min、20 min、25 min和30 min.染色完成后,镜下对比不同条件下抗原抗体复合物表达的情况.结果:P504S在pH 9.0的EDTA-Tris缓冲液中修复20 min阳性信号最强,阳性细胞比率最高;P63在pH 9.0的EDTA-Tris缓冲液中修复30 min阳性信号最强,阳性细胞比率最高; Ki-67在pH 9.0的EDTA-Tris缓冲液中修复25 min阳性信号最强,阳性细胞比率最高;CD10在不同pH值的缓冲液中修复20 min或25 min效果相同,都能得到最强表达.结论:不同的抗原有其各自最适合的抗原修复液、pH值范围和最适修复时间.相对来说, 高pH值的EDTA-Tris缓冲液的修复效果要优于低pH值的修复液.

关键词: 抗原, 氢离子浓度, 免疫组织化学, 染色与标记

[1] 于妍斐,何世明,吴宇财,熊盛炜,沈棋,李妍妍,杨风,何群,李学松. 延胡索酸水合酶缺陷型肾细胞癌的临床病理特征及预后[J]. 北京大学学报(医学版), 2021, 53(4): 640-646.
[2] 邱敏,费月阳,邓绍晖,刘承,卢剑,何为,陆敏,田晓军,张树栋,马潞林. 后肾腺瘤的诊治经验及文献回顾[J]. 北京大学学报(医学版), 2021, 53(2): 417-419.
[3] 池彦廷,张延平,张秋露,刘翠苓,李斌斌. 唾液腺干燥综合征继发黏膜相关淋巴组织淋巴瘤的临床病理分析[J]. 北京大学学报(医学版), 2021, 53(1): 40-45.
[4] 孙奎霞,闫存玲,李志艳,刘平,张伟,何群. 前列腺特异性抗原同源异构体2及其衍生指标在预测前列腺癌病理分级中的价值[J]. 北京大学学报(医学版), 2020, 52(2): 234-239.
[5] 马茹,李鑫宝,闫风彩,林育林,李雁. 肿瘤间质比评估阑尾来源腹膜假黏液瘤的临床价值[J]. 北京大学学报(医学版), 2020, 52(2): 240-246.
[6] 张晓鹏,张维宇,霍飞,胡浩,王起,许克新. 原发性女性膀胱出口梗阻的手术疗效随访及其发病机制[J]. 北京大学学报(医学版), 2019, 51(6): 1052-1055.
[7] 张春凤,刘云,陆敏,杜晓娟. hUTP14a在非小细胞肺癌组织中的表达[J]. 北京大学学报(医学版), 2019, 51(1): 145-150.
[8] 包菊,刘佳,曲元,穆东亮. 脐动脉血气pH值对剖宫产新生儿住院期间并发症的预测价值[J]. 北京大学学报(医学版), 2019, 51(1): 159-164.
[9] 刘蕾,王丽华,任玉波,饶晓松,杨邵敏. 盆腹腔软组织侵袭性血管黏液瘤临床病理分析[J]. 北京大学学报(医学版), 2018, 50(6): 1098-1101.
[10] 周建华,王地,王焕瑞,侯晓利,郁卫东,许克新,胡浩. γδT细胞对膀胱癌细胞的细胞毒活性及MICA/B蛋白在膀胱癌中的表达[J]. 北京大学学报(医学版), 2018, 50(4): 595-601.
[11] 梅放,赵婷婷,高菲,郑杰. 肺罕见良性双相分化性肿瘤——肺腺纤维瘤1例并文献复习[J]. 北京大学学报(医学版), 2017, 49(6): 1076-1080.
[12] 刘静维, 卢戌, 杨照敏, 邓丽娟, 杨林. 负载NY-ESO-1多肽的树突状细胞激发特异性细胞毒性T淋巴细胞反应[J]. 北京大学学报(医学版), 2017, 49(5): 840-846.
[13] 余建峰, 金月波, 何菁, 安媛, 栗占国. 皮肌炎继发干燥综合征伴肺间质病变的血清人Ⅱ型肺泡细胞表面抗原变化1例[J]. 北京大学学报(医学版), 2017, 49(5): 910-914.
[14] 刘畅, 崔立刚, 王宏磊. 肾尤文氏肉瘤/原始神经外胚层肿瘤: 1例报道并文献复习[J]. 北京大学学报(医学版), 2017, 49(5): 919-923.
[15] 纪光杰,黄聪,宋刚,李学松,宋毅,周利群. 去势抵抗性前列腺癌进展时间的预测因素分析[J]. 北京大学学报(医学版), 2017, 49(4): 657-662.
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[1] 张三. 中文标题测试[J]. 北京大学学报(医学版), 2010, 42(1): 1 -10 .
[2] 赵磊, 王天龙 . 右心室舒张末期容量监测用于肝移植术中容量管理的临床研究[J]. 北京大学学报(医学版), 2009, 41(2): 188 -191 .
[3] 万有, , 韩济生, John E. Pintar. 孤啡肽基因敲除小鼠电针镇痛作用增强[J]. 北京大学学报(医学版), 2009, 41(3): 376 -379 .
[4] 张燕, 韩志慧, 钟延丰, 王盛兰, 李玲玲, 郑丹枫. 骨骼肌活组织检查病理诊断技术的改进及应用[J]. 北京大学学报(医学版), 2009, 41(4): 459 -462 .
[5] 赵奇, 薛世华, 刘志勇, 吴凌云. 同向施压测定自酸蚀与全酸蚀粘接系统粘接强度[J]. 北京大学学报(医学版), 2010, 42(1): 82 -84 .
[6] 林红, 王玉凤, 吴野平. 学校生活技能教育对小学三年级学生行为问题影响的对照研究[J]. 北京大学学报(医学版), 2007, 39(3): 319 -322 .
[7] 丰雷, 程嘉, 王玉凤. 注意缺陷多动障碍儿童的运动协调功能[J]. 北京大学学报(医学版), 2007, 39(3): 333 -336 .
[8] 李岳玲, 钱秋瑾, 王玉凤. 儿童注意缺陷多动障碍成人期预后及其预测因素[J]. 北京大学学报(医学版), 2007, 39(3): 337 -340 .
[9] . 书讯[J]. 北京大学学报(医学版), 2007, 39(3): 225 -328 .
[10] 牟向东, 王广发, 刁小莉, 阙呈立. 肺黏膜相关淋巴组织型边缘区B细胞淋巴瘤一例[J]. 北京大学学报(医学版), 2007, 39(4): 346 -350 .