北京大学学报(医学版) ›› 2006, Vol. 38 ›› Issue (3): 257-261.
雷新军,马爱群,席雨涛,张葳,姚艳,杜媛
摘要: 目的:研究人单核细胞源性巨噬细胞向泡沫细胞分化过程中,电压依赖性钾通道1.3(voltage-dependent potassium channel 1.3,Kv1.3)mRNA和蛋白的表达及作用.方法:采用密度梯度离心加贴壁黏附法,从男性健康志愿者的外周血中分离单核细胞,经5 d培养后分化为巨噬细胞.在建立人巨噬细胞源性泡沫细胞模型的基础上,采用免疫细胞化学染色法、逆转录聚合酶链反应(transcription-polymerase chain raction,RT-PCR)及Western blot,研究Kv1.3通道的表达,并观察其特异性阻断剂--rMargatoxin对摄取氧化修饰低密度脂蛋白(OxLDL)的巨噬细胞胆固醇代谢的影响.结果:将巨噬细胞同30 mg/L OxLDL于37℃孵育60 h后,细胞体积增大,并有许多红色的脂质颗粒沉积于细胞质内,细胞内的总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)及胆固醇酯(CE)的含量均显著增加,CE/TC从(14.4±6.8)%提高到(57.9±3.5)%(n=7,P<0.05);而Kv1.3通道mRNA及蛋白的表达水平没有明显改变.0.1 nmol/L和10 nmol/L的rMargatoxin能显著减少巨噬细胞内TC、FC及CE的含量,CE/TC分别降至(42.8±11.6)%和(22.6±8.0)%(n=7,P<O.05),细胞内沉积的红色脂质颗粒也明显减少.结论:人单核细胞源性巨噬细胞向泡沫细胞分化过程中,Kv1.3通道的表达无明显改变.特异性阻断Kv1.3能防止泡沫细胞形成.
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