摘要： 目的:制备4种尤文肉瘤树突状细胞(dendritic cell,DC)疫苗,并比较和分析其在体内外抗肿瘤免疫反应中的效果.方法:从健康供者体中分离和培养外周血单核细胞,利用粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, GM-CSF)和白细胞介素(interleukin-4,IL-4)将单核细胞诱生为DC,并对其表型进行流式细胞仪分析,分别制备4种DC疫苗:(1)融合瘤,将DC与A673细胞进行电融合,并通过流式细胞仪检测荧光双染色融合瘤,以确定其融合率;(2)负载肿瘤裂解物DC,将DC与A673细胞反复冻融物共培养;(3)EWS/FLI1修饰DC,用编码EWS/FLI1的腺病毒转染DC;(4)未作处理的成熟的DC.将各种DC疫苗与组织相容性白细胞抗原(histocompatibility leukocyte antigen,HLA)相配的CD8+T细胞共培养,用ELISA试剂盒检测刺激增殖细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxicity T lymphocyte,CTL)分泌干扰素γ(interferon γ,IFN-γ)的量,用51Cr细胞杀伤试剂盒检测CTL在不同比例下对A673细胞的杀伤作用.通过腹腔注射人外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte,PBL),皮下接种A673细胞,构建重建人免疫系统的SCID鼠尤文肉瘤模型,应用ELISA试剂盒检测小鼠外周血中IgG的量,以确定免疫重建效果,并接种不同的DC疫苗,检测其对小鼠成瘤的影响.结果:流式细胞术检测出从外周血单核细胞诱生出的CD83、CD80、CD86及HLA-DR高表达的成熟DC.DCs/A673融合细胞的电融合效率达到16.32%.各种DC疫苗都可以诱导出有效的抗肿瘤免疫反应,IFN-γ分泌检测显示,融合瘤组较其他DC疫苗组产生CTL水平高,其后依次为肿瘤裂解物负载组、EWS/FLI1修饰组和未作处理组.而在体外杀伤A673实验中,融合瘤组杀伤效率最高,肿瘤裂解物负载组次之,EWS/FLI1修饰组与未作处理组最低,且后两组间差异无统计学意义.在抑制肿瘤生长的体内实验中,融合瘤组小鼠肿瘤最小,EWS/FLI1修饰组、肿瘤裂解物负载组和未作处理组之间差别不大.结论:尤文肉瘤DC疫苗可以诱导有效的抗肿瘤免疫反应,将各种尤文肉瘤DC疫苗进行体内外综合比较时发现,融合瘤是最佳的尤文肉瘤免疫疫苗.
| [1] | 王滨帅,邱敏,张前进,田茂锋,刘磊,王国良,陆敏,田晓军,张树栋. 6例肾尤文肉瘤伴静脉瘤栓的诊治[J]. 北京大学学报（医学版）, 2024, 56(4): 636-639. |
| [2] | 金银姬,孙琳,赵金霞,刘湘源. 血清IgA型抗鼠科肉瘤病毒癌基因同源物B1抗体在类风湿关节炎中的意义[J]. 北京大学学报（医学版）, 2023, 55(4): 631-635. |
| [3] | 王微,李鑫,柳萍,董颖. 荧光原位杂交检测MDM2和DDIT3基因信号改变在诊断脂肪肉瘤中的价值[J]. 北京大学学报（医学版）, 2023, 55(2): 228-233. |
| [4] | 农琳,王微,梁丽,李东,李鑫,李挺. 母细胞性浆样树突细胞肿瘤13例临床病理学特征[J]. 北京大学学报（医学版）, 2023, 55(2): 308-314. |
| [5] | 叶剑飞,赵磊,王国良,洪锴,马潞林. 睾丸横纹肌肉瘤的诊治分析[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(6): 1178-1182. |
| [6] | 毕海,黄毅,马潞林,陆敏,张树栋,张洪宪. 3例肾尤文肉瘤合并下腔静脉癌栓的诊治[J]. 北京大学学报（医学版）, 2020, 52(5): 985-989. |
| [7] | 任军,杨朵. 提高过继性T细胞免疫治疗临床疗效的新思考----肠道菌群与肿瘤免疫[J]. 北京大学学报（医学版）, 2020, 52(2): 204-206. |
| [8] | 李军,牛占岳,薛艳,石雪迎,张波,王媛. 重度溃疡性结肠炎合并卡波西肉瘤1例并文献综述[J]. 北京大学学报（医学版）, 2020, 52(2): 373-377. |
| [9] | 林国中,王振宇,刘彬,杨邵敏. 腺泡状横纹肌肉瘤椎管内转移1例[J]. 北京大学学报（医学版）, 2019, 51(6): 1165-1168. |
| [10] | 张帆,燕太强,郭卫. Rasfonin抑制骨肉瘤细胞143B的增殖和迁移[J]. 北京大学学报（医学版）, 2019, 51(2): 234-238. |
| [11] | 梅放，赵婷婷，高菲，郑杰. 肺罕见良性双相分化性肿瘤——肺腺纤维瘤1例并文献复习[J]. 北京大学学报(医学版), 2017, 49(6): 1076-1080. |
| [12] | 刘畅, 崔立刚, 王宏磊. 肾尤文氏肉瘤/原始神经外胚层肿瘤: 1例报道并文献复习[J]. 北京大学学报(医学版), 2017, 49(5): 919-923. |
| [13] | 金银姬，赵金霞，孙琳，杨麟，邢瑞，刘湘源. 血清鼠科肉瘤病毒癌基因同源物B1蛋白的检测与类风湿关节炎[J]. 北京大学学报(医学版), 2016, 48(6): 947-950. |
| [14] | 叶海云，许清泉，黄晓波，马凯，王晓峰. 卡介苗膀胱灌注治疗致结核性前列腺脓肿1例[J]. 北京大学学报(医学版), 2015, 47(6): 1039-1041. |
| [15] | 肖宗宇, 陈晓娟, 杨艺, 徐如祥. 肿瘤干细胞样细胞RNA致敏树突状细胞治疗大鼠9L脑肿瘤[J]. 北京大学学报(医学版), 2015, 47(4): 661-666. |
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