摘要： 目的：研究在重组人肿瘤坏死因子（recombinant human tumor necrosis factor alpha，rhTNF-α）刺激下人脂肪基质细胞（human adipose tissue-derived stromal cells, hADSCs）增殖的改变及成骨向分化前后血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、成纤维细胞生长因子2（fibroblast growth factor-2，FGF-2）和胰岛素样生长因子1（insulin-like growth factor-1，IGF-1）分泌的变化。方法：采用吸脂术获得的第4代hADSCs，以终浓度为0、1、5、10、50、100 μg/L的rhTNF-α刺激hADSCs，分别在48、72、96 h后行MTT法检测不同浓度rhTNF-α对hADSCs增殖的影响；并以该浓度梯度的rhTNF-α刺激hADSCs，24 h后收集上清，以ELISA法检测VEGF、FGF-2和IGF-1的分泌情况；在成骨向诱导的第1、3、7、14天收集细胞上清，ELISA法检测上述3种生长因子分泌的变化，收集细胞上清前24 h更换培养基，并在相应孔中加入rhTNF-α，使其终浓度为10 μg/L。所有ELISA数据均以相应培养孔的细胞数进行校正。结果：rhTNF-α能促进hADSCs的增殖，其作用表现为一定的浓度和时间依赖。相比于对照组，48 h时，10 μg/L rhTNF-α对增殖的促进作用并不明显，但96 h时则表现为促进作用（P<0.01），而100 μg/L rhTNF-α在48 h表现为抑制作用（P<0.01），96 h时则表现为明显的促进作用（P<0.01）。相对于对照组，rhTNF-α可以显著促进hADSCs分泌VEGF、FGF-2和IGF-1（P<0.01）；hADSCs经成骨向诱导后，上述3种生长因子的分泌有增加的趋势；不同成骨向分化阶段的hADSCs用10 μg/L rhTNF-α刺激后，在诱导第1天，rhTNF-α显著促进VEGF的分泌（P<0.01），但对FGF-2和IGF-1的分泌无显著性影响；在诱导第3天和第7天，rhTNF-α对VEGF（P<0.01）、FGF-2（P<0.05）和IGF-1（P<0.05）的分泌均有促进作用；但在第14天则抑制VEGF（P<0.01）、FGF-2（P<0.05）和IGF（P<0.05）的分泌。结论：一定浓度的rhTNF-α对hADSCs的增殖有促进作用；hADSCs分泌VEGF、FGF-2和IGF-1具有rhTNF-α的浓度依赖；在不同成骨向分化阶段，rhTNF-α对hADSCs分泌VEGF、FGF-2和IGF-1这3种生长因子的作用不同。

关键词: 肿瘤坏死因子α, 脂肪组织, 间质细胞, 血管生成诱导剂