北京大学学报(医学版) ›› 2012, Vol. 44 ›› Issue (6): 954-959.

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NF-κB报告基因重组腺病毒的构建及活性分析

郭金海1,2△,王峰2,王平章2,赵丽2,石太平2,陈英玉1,3   

  1. (1.北京大学基础医学院免疫学系,卫生部医学免疫重点实验室,北京100191; 2. 国家人类基因组北方研究中心,北京100176; 3.北京大学人类疾病基因研究中心,北京100191)
  • 出版日期:2012-12-18 发布日期:2012-12-18

  • Online:2012-12-18 Published:2012-12-18

摘要: 目的:探讨基于腺病毒载体的核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)报告基因系统作为NF-κB上游调控信号分子筛选模型的可行性。方法:利用5型E1/E3缺陷型腺病毒载体pAdxsi构建NF-κB报告基因的重组腺病毒,并利用该腺病毒感染多种贴壁细胞和悬浮细胞进行NF-κB报告基因的活性分析。结果:成功构建了NF-κB报告基因重组腺病毒Ad-NF-κB-luc,其能够感染HepG2、MGC803、THP-1、U937等细胞,肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)或脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激显示重组腺病毒携带的NF-κB报告基因具有活性。结论:以腺病毒Ad-NF-κB-luc作为NF-κB报告基因的转移载体,不仅可以感染常规方法难以转染的细胞系,而且产生的报告基因活性稳定可靠,拓展了NF-κB报告基因的应用范畴。

关键词: NF-κB, 腺病毒, 基因, 报告, 萤光素酶类

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