北京大学学报(医学版) ›› 2013, Vol. 45 ›› Issue (5): 807-814.
彭建平1,寇玉辉2,邓玖旭2,张培训2,殷晓锋2,姜保国2△
摘要: 目的:制作单纯运动/感觉神经纤维动物模型并鉴定。方法:以SPF级SD大鼠为实验动物,随机分为感觉神经组(A组)、运动神经组(B组)、正常对照组(C组),A组选择性切除L2~L4腹根,B组选择性切除L2~L4背根神经节、C组不做手术处理。术后2周、4周,取股四头肌行HE染色,腰髓行神经元核抗原(neuronal nuclei, NeuN)免疫组织化学染色,计数A组腰髓后角感觉神经元、B组腰髓前角运动神经元,股神经干分叉部分行锇酸染色,观察有髓神经纤维在皮支和肌支中的数量变化。结果:A组中大鼠右后肢股四头肌萎缩并逐渐加重,无自噬;B组中大鼠右后肢轻度肿胀,不同程度自噬,无肌肉萎缩。神经元计数:A组中,L2~L4段腰髓中平均每个10×20倍显微镜视野下感觉神经元计数分别为62.12±1.77(2周)、62.15±1.32(4周);B组中,L2~L4段腰髓中平均每个10×20倍视野下前角运动神经元计数分别为30.12±0.44(2周)、30.00±1.87(4周);C组中,平均每个10×20倍视野下后角感觉神经元计数为62.57±1.02,前角运动神经元计数为29.73±3.03;两个时间点与正常L2~L4段脊髓神经元计数差异无统计学意义。A组中,股神经肌支中部分神经纤维退变,皮支中无退变,有髓神经纤维计数为:1 558.17±50.14(2周)、1 544.00±47.42(4周);B组中,股神经皮支神经纤维均退变、肌支中部分神经纤维退变,有髓神经纤维计数分别为387.67±48.50(2周)、393.50±27.86(4周),2周和4周的计数结果比较差异无统计学意义。2周时退变的轴突及髓鞘尚未完全清除,4周时退变的轴突及髓鞘已完全清除。结论:通过选择性切除腹根/背根神经节可以获得单纯感觉神经/运动纤维动物模型。术后4周时,退变的轴突及髓鞘已完全清除,此时可获得良好的单纯性质周围神经,以此方法制作单纯感觉/运动神经纤维动物模型稳定可靠,可用于以后的实验研究中。
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