摘要： 目的：研究特异性沉默人源性长寿保障基因2 ( homosapiens longevity assurance homologue 2, LASS2，亦称TMSG1)的小干扰RNA ( small interfering RNA， siRNA)对人前列腺癌细胞系低转移潜能亚系PC-3M-2B4的体外侵袭能力的影响及相关机制。方法：通过脂质体转染法将特异性沉默LASS2基因的siRNA转染入PC-3M-2B4细胞。分别用实时荧光定量PCR( real-time fluorogenetic quantitative PCR, RFQ-PCR) 和Western blot方法检测LASS2 siRNA对PC-3M-2B4 细胞LASS2基因和蛋白表达的抑制作用，筛选有效的siRNA片段；运用液泡型ATPases（vacuolar H⁺-ATPases，V-ATPases）活性测定试剂盒来检测PC-3M-2B4细胞的V-ATPases活性；运用BCECF氢离子敏感荧光探针检测PC-3M-2B4细胞外氢离子浓度；采用Western blot方法分析PC-3M-2B4细胞的基质金属蛋白酶2 (matrix metalloproteinase 2，MMP-2 )的表达及分泌情况；应用明胶酶谱法检测PC-3M-2B4细胞上清液中MMP-2的活性；利用细胞划痕修复实验和Transwell法检测细胞体外迁移及侵袭能力。结果：通过RFQ-PCR 和Western blot筛选后， siRNA-2能显著抑制PC-3M-2B4 细胞LASS2基因mRNA和蛋白的表达，对mRNA表达的抑制率可达84.5%，对蛋白表达的抑制率可达60%。PC-3M-2B4细胞转染LASS2 siRNA-2后，其V-ATPases的活性及细胞外氢离子浓度明显升高，与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05) ；MMP-2蛋白的表达及分泌无明显变化，但分泌的MMP-2的活性形式增加，与空白对照组相比明显提高，差异有统计学意义(P<0.05)；且细胞的体外迁移及侵袭能力明显高于空白对照组( P<0.05 )。结论：特异性siRNA沉默LASS2基因能促进人前列腺癌细胞体外侵袭能力，其机制与沉默LASS2基因后激活V-ATPase，从而使细胞外氢离子浓度升高，进而激活MMP-2有关，提示LASS2基因是一新的肿瘤转移抑制基因。