短肽库中血管内皮细胞生长因子受体Flt-1拮抗剂筛选条件的改进

摘要/Abstract

摘要： 目的:改进噬菌体肽库的筛选条件,提高筛选阳性率及阳性克隆重复性.使血管内皮细胞生长因子受体Flt-1拮抗剂的筛选更为有效.方法:通过对血管内皮细胞生长因子受体Flt-1的原核表达产物的变性复性处理,获得相对纯化的可溶性Flt-1受体.将该可溶性受体固相化,对噬菌体表达12肽库进行4 ～ 5轮Bio-panning后,挑取单个噬菌斑制备高滴度噬菌体上清.用ELISA法初步鉴定各噬菌体克隆与sFlt-1的特异性结合并测定阳性克隆的DN A 顺序.在Bio-panning过程中增加非特异性蛋白的预吸附,并减少输入噬菌体数量, 再次筛选短肽库.结果:经过第一次筛选,获得了一系列具有一定重复性与同源性的噬菌体克隆. 改进筛选条件后,筛选阳性率由2%提高到8.3%,阳性克隆的重复性也得到显著提高.该高重复阳性克隆的氨基酸顺序与前一次筛选获得的阳性克隆有较高同源性.结论:Bio-panning 条件的改进提高了筛选效率,为不纯蛋白筛选短肽库积累了经验,并为血管内皮细胞生长因子受体拮抗剂的研制奠定了基础.

关键词: 血管内皮细胞生长因子, 血管内皮细胞生长因子受体, 噬菌体, 内皮, 血管, 内皮生长因子/拮抗剂和抑制剂

安平, 寿成超, 孟麟, 董志伟. 短肽库中血管内皮细胞生长因子受体Flt-1拮抗剂筛选条件的改进[J]. 北京大学学报（医学版）, 2001, 33(5): 398-401.

参考文献

相关文章 15

[1]	李伟浩,李伟,张学民,李清乐,焦洋,张韬,蒋京军,张小明. 去分支杂交手术和传统手术治疗胸腹主动脉瘤的结果比较[J]. 北京大学学报（医学版）, 2022, 54(1): 177-181.
[2]	任国勇,吴雪梅,李颖,李婕妤,孙伟平,黄一宁. 大血管闭塞性脑卒中亚急性期磁敏感血管征的表现[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(6): 1133-1138.
[3]	白鹏,王涛,周阳,陶立元,李刚,李正迁,郭向阳. 不同转流标准对颈动脉内膜切除术后脑梗死的影响[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(6): 1144-1151.
[4]	庄金满,李天润,李选,栾景源,王昌明,冯琦琛,韩金涛. Rotarex经皮机械性血栓切除装置在急性下肢缺血中的应用[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(6): 1159-1162.
[5]	杜文瑜,杨静文,姜婷. 甲磺酸去铁胺促进大鼠颅骨临界骨缺损血管化骨再生的早期连续观察[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(6): 1171-1177.
[6]	刘承,马潞林. 前入路机器人辅助前列腺根治性切除术中改善排尿控制的经验[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(4): 635-639.
[7]	康文玉,王璐,邱敏,张帆,郭巍,强亚勇,拓鹏飞,宗有龙,刘磊磊,王帅帅. 肾上腺海绵状血管瘤1例及文献回顾[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(4): 808-810.
[8]	申杰, 杨迪, 陈梦圆, 郭新彪. 长度和化学修饰在多壁碳纳米管诱导内皮细胞活化中的作用[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(3): 439-446.
[9]	郭子宁, 梁志生, 周仪, 张娜, 黄捷. 基于国际疾病分类的心血管疾病亚型的基因组学研究[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(3): 453-459.
[10]	刘秋萍,陈汐瑾,王佳敏,刘晓非,司亚琴,梁靖媛,沈鹏,林鸿波,唐迅,高培. 基于马尔可夫模型的社区人群心血管病筛查策略的效果评价[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(3): 460-466.
[11]	黄丽东,宫玮玉,董艳梅. 生物活性玻璃对人脐静脉血管内皮细胞增殖及成血管的作用[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(2): 371-377.
[12]	石茂静,高伟波,黄文凤,朱继红. 61例血栓性血小板减少性紫癜患者的临床分析[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(1): 210-214.
[13]	陈家丽,金月波,王一帆,张晓盈,李静,姚海红,何菁,李春. 老年发病类风湿关节炎的临床特征及其心血管疾病危险因素分析:一项大样本横断面临床研究[J]. 北京大学学报（医学版）, 2020, 52(6): 1040-1047.
[14]	孙鹿希,刘金晶,侯云霞,李超然,李璐,田新平,曾小峰,郑文洁. 戈利木单抗治疗白塞综合征心脏大血管受累的临床分析[J]. 北京大学学报（医学版）, 2020, 52(6): 1056-1062.
[15]	程功,张霞,杨菲,程嘉渝,刘燕鹰. 以发热、关节炎、皮肤色素沉着为主要表现的血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤1例[J]. 北京大学学报（医学版）, 2020, 52(6): 1150-1152.

Metrics

Viewed

Full text

Abstract

Cited

Shared

Discussed

本文评价

推荐阅读 10

[1]	张三. 中文标题测试[J]. 北京大学学报（医学版）, 2010, 42(1): 1 -10 .
[2]	田增民, 陈涛, Nanbert ZHONG, 李志超, 尹丰, 刘爽. 神经干细胞移植治疗遗传性小脑萎缩的临床研究（英文稿）[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(4): 456 -458 .
[3]	郭岩, 谢铮. 用一代人时间弥合差距——健康社会决定因素理论及其国际经验[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(2): 125 -128 .
[4]	成刚, 钱振华, 胡军. 艾滋病项目自愿咨询检测的技术效率分析[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(2): 135 -140 .
[5]	卢恬, 朱晓辉, 柳世庆, 郑杰, 邱晓彦. 白细胞介素2促进宫颈癌细胞系HeLaS3免疫球蛋白G的表达[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(2): 158 -161 .
[6]	赵磊, 王天龙 . 右心室舒张末期容量监测用于肝移植术中容量管理的临床研究[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(2): 188 -191 .
[7]	袁惠燕, 张苑, 范田园. 离子交换型栓塞微球及其载平阳霉素的制备与性质研究[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(2): 217 -220 .
[8]	徐莉, 孟焕新, 张立, 陈智滨, 冯向辉, 释栋. 侵袭性牙周炎患者血清中抗牙龈卟啉单胞菌的IgG抗体水平的研究[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(1): 52 -55 .
[9]	董稳, 刘瑞昌, 刘克英, 关明, 杨旭东. 氯诺昔康和舒芬太尼用于颌面外科术后自控静脉镇痛的比较[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(1): 109 -111 .
[10]	祁琨, 邓芙蓉, 郭新彪. 纳米二氧化钛颗粒对人肺成纤维细胞缝隙连接通讯的影响[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(3): 297 -301 .