北京大学学报(医学版) ›› 2003, Vol. 35 ›› Issue (1): 91-93.
王盛兰,钟延丰,管增伟,王薇,廖松林
摘要: 目的:探讨荧光显微技术在检测细胞凋亡中的作用.方法:应用拓扑异构酶Ⅱ抑制剂VP-16及化学毒物叠氮钠分别诱导HL-60细胞凋亡和死亡,用透射电镜和经Hoechst 33258染色的荧光显微镜对凋亡及死亡动态观察和定量分析.结果:HL-60细胞在VP16处理后,荧光显微镜下可见核浓缩、染色质凝聚、核碎裂等凋亡特征;而叠氮钠诱导的细胞死亡则出现核溶解、核染色质弥散,但无上述改变;两者电镜的观察与荧光显微镜的改变一致;凋亡细胞及坏死细胞荧光显微镜下呈不同的形态特征.对处理的不同时间点细胞的荧光显微镜观察发现:处理后4 h核形态开始变化,有核浓缩的细胞比例在处理的8 h达高峰,然后下降,核碎裂细胞的比例在24 h达高峰,约占80%,表明核浓缩发生在核碎裂之前.结论:荧光显微镜技术可明确观察判断细胞凋亡及坏死,并可进行动态及定量分析,是良好的凋亡检测方法.
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