北京大学学报(医学版) ›› 2004, Vol. 36 ›› Issue (2): 154-158.

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Clusterin在前列腺癌LNCaP细胞中的抗凋亡作用

辛殿祺,朱绪辉,艾军魁,那彦群,郭应禄   

  1. (北京大学第一医院泌尿外科,北京大学泌尿外科研究所,北京 100034)
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2004-04-18 发布日期:2004-04-18

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2004-04-18 Published:2004-04-18

摘要: 目的:探讨Clusterin及其不同功能区域在前列腺癌细胞中的抗凋亡作用.方法:以pIRES2-EGFP质粒为载体,构建含有全长及缺失前导序列(1eader sequence)的Clusterin重组质粒,分别命名为pIRES2-EGFP/cluac、pIRES2-EGFP/clubc.重组质粒转染前列腺癌细胞LNCaP后,以Western blot检测LNCaP细胞及其培养上清液中Clusterin的表达,免疫细胞化学法检测不同功能区域Clusterin在细胞中的分布情况.应用Na2Se03诱导LNCaP细胞凋亡,用流式细胞术(FCM)及荧光显微镜检测Clusterin的抗凋亡作用.结果:在转染pIRES2-EGFP/cluac的LNCaP细胞培养上清及细胞裂解液中均检测到Clusterin的表达,转染pIRES2-EGFP/clubc的LNCaP细胞,仅细胞裂解液中有Clusterin的表达,而培养上清液中未检测到.pIRES2-EGFP/cluac转染细胞中Clusterin在胞浆中呈聚集状态,而pIRES2-EGFP/clubc转染细胞中Clusterin呈弥散分布.FCM及荧光显微镜检测证实,cluac转染对Na2SeO3诱导的LNCaP细胞凋亡有明显的抑制作用.结论:Clusterin有明显的抗前列腺癌细胞凋亡作用,Clusterin前导序列是其发挥抗凋亡作用的必需功能区域.

关键词: Clusterin, 前列腺肿瘤, 细胞, 凋亡, 免疫组织化学

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