北京大学学报(医学版) ›› 2009, Vol. 41 ›› Issue (2): 152-157.

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实时定量PCR阵列检测小鼠大脑组织microRNA表达谱

张旗,何湘君△,刘玉京,马丽萍,潘秀英
  

  1. (北京大学人民医院临床分子生物学研究所,北京100044)
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2009-04-18 发布日期:2009-04-18

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2009-04-18 Published:2009-04-18

摘要: 目的:分析小鼠大脑组织microRNA(miRNA)表达谱,为研究特定miRNA及其靶基因、中枢神经系统miRNA相关的调节网络,以及miRNA在中枢神经系统疾病中的作用提供参考。方法:采用RNA加尾和引物延伸序列RT-PCR法,将精心设计的特异引物按Tm值排成阵列,用梯度实时PCR仪在不同的退火温度扩增每一个miRNA,并计算出每种miRNA相对于内参的表达量。结果:共检测了285个miRNA,阳性者260个,它们丰度不同,频数分布图大致呈正态。大部分miRNA的表达水平与已发表的芯片结果一致,而阳性率高于芯片结果。源自同一miRNA前体的2个成熟miRNA表达量,有些相差无几,有些则相差甚多。同簇相邻miRNA的丰度有些相近,有些则差异明显,提示miRNA转录后的归宿决定其丰度。结论:采用实时定量PCR阵列法,分析了小鼠大脑组织的miRNA表达谱,特别是获得了一些低丰度miRNA在小鼠大脑中表达的数据,这将有助于对这些低丰度miRNA的功能研究。

关键词: 微RNAs, 基因表达谱, 逆转录聚合酶链反应, 小鼠

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