微颗粒携带microRNA-126在细胞间信号传递中的作用

摘要/Abstract

摘要： 目的：探讨微颗粒(microparticles，MP)作为载体携带microRNAs(miRNAs)在介导细胞间信号传递中的作用。方法：用梯度离心的方法获得人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVEC)和293T细胞来源的微颗粒，将微颗粒与人急性单核细胞白血病细胞（THP-1细胞）共培养，然后应用transwell迁移实验观察THP-1细胞迁移情况；用实时定量聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）及Western blotting实验的方法，分析微颗粒携带miRNAs影响单核细胞迁移的机制。结果：通过transwell实验发现，HUVEC细胞来源的微颗粒（MPHUVEC）组THP-1细胞迁移数明显多于293T细胞来源的微颗粒（MP^293T）组，差异有统计学意义（P<0.05）；MP^HUVEC组THP-1细胞CXCR4 mRNA及蛋白表达水平均明显高于MP293T组，差异有统计学意义（P<0.05）。HUVEC细胞分别给予lipo2000、lipo2000＋miRNA inhibitor和lipo2000＋miRNA-126 inhibitor不同处理获得的微颗粒为MP^con、MP ^neg-con、MP ^{miR-126 inhibitor}，与MP^con组、MP ^neg-con组相比， MP^{miR-126 inhibitor}组THP-1细胞迁移数明显减少，差异有统计学意义（P<0.05）；MP ^miR-126 ^inhibitor组THP-1细胞CXCR4 mRNA及蛋白表达水平显著低于MP^con组、MP ^neg-con组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：HUVEC细胞来源的微颗粒可以携带miRNA-126促进单核细胞迁移，微颗粒作为载体可以携带miRNAs介导细胞间信号传递。

关键词: 微颗粒, 微RNAs, 细胞间通讯

Abstract: Objective：To investigate the role of microRNAs (miRNAs) in mediating intercellular signaling. Methods: Microparticles (MP) from HUVEC and 293T were isolated by sequential centrifugation. THP-1 was co-cultured with microparticles. And then the migration of THP-1 was measured by transwell. Real-time PCR and Western blotting were used to study the related mechanisms. Results: Compared with the microparticles from 293T, MP from HUVEC could promote the migration of monocytes (P<0.05) and upregulate the expression of CXCR4 mRNA and protein (P<0.05). MiRNA-126 deficient MP could downregulate the migration of monocytes (P<0.05) and the expression of CXCR4 mRNA and protein (P<0.05) compared with miRNA-126 abundant MP. Conclusion: Microparticles from HUVEC could promote the migration of monocytes. As carriers, microparticles could mediate intercellular signaling.

Key words: Microparticles, micro RNAs, Cell communication

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