北京大学学报(医学版) ›› 2014, Vol. 46 ›› Issue (6): 894-898.

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微颗粒携带microRNA-126在细胞间信号传递中的作用

耿强,陈红△,任景怡,宋俊贤,李素芳   

  1. (北京大学人民医院心脏中心,北京100044)
  • 出版日期:2014-12-18 发布日期:2014-12-18

microRNA-126 delivered by microparticles mediates intercellular signal transmission

GENG Qiang, CHEN Hong△, REN Jing-yi, SONG Jun-xian, LI Su-fang   

  1. (Department of Cardiology, Peking University People’s Hospital, Beijing 100044)
  • Online:2014-12-18 Published:2014-12-18

摘要: 目的:探讨微颗粒(microparticles,MP)作为载体携带microRNAs(miRNAs)在介导细胞间信号传递中的作用。方法:用梯度离心的方法获得人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)和293T细胞来源的微颗粒,将微颗粒与人急性单核细胞白血病细胞(THP-1细胞)共培养,然后应用transwell迁移实验观察THP-1细胞迁移情况;用实时定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)及Western blotting实验的方法,分析微颗粒携带miRNAs影响单核细胞迁移的机制。结果:通过transwell实验发现,HUVEC细胞来源的微颗粒(MPHUVEC)组THP-1细胞迁移数明显多于293T细胞来源的微颗粒(MP293T)组,差异有统计学意义(P<0.05);MPHUVEC组THP-1细胞CXCR4 mRNA及蛋白表达水平均明显高于MP293T组,差异有统计学意义(P<0.05)。HUVEC细胞分别给予lipo2000、lipo2000+miRNA inhibitor和lipo2000+miRNA-126 inhibitor不同处理获得的微颗粒为MPcon、MP neg-con、MP miR-126 inhibitor,与MPcon组、MP neg-con组相比, MP miR-126 inhibitor组THP-1细胞迁移数明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);MP miR-126 inhibitor组THP-1细胞CXCR4 mRNA及蛋白表达水平显著低于MPcon组、MP neg-con组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HUVEC细胞来源的微颗粒可以携带miRNA-126促进单核细胞迁移,微颗粒作为载体可以携带miRNAs介导细胞间信号传递。

关键词: 微颗粒, 微RNAs, 细胞间通讯

Abstract: Objective:To investigate the role of microRNAs (miRNAs) in mediating intercellular signaling. Methods: Microparticles (MP) from HUVEC and 293T were isolated by sequential centrifugation. THP-1 was co-cultured with microparticles. And then the migration of THP-1 was measured by transwell. Real-time PCR and Western blotting were used to study the related mechanisms. Results: Compared with the microparticles from 293T, MP from HUVEC could promote the migration of monocytes (P<0.05) and upregulate the expression of CXCR4 mRNA and protein (P<0.05). MiRNA-126 deficient MP could downregulate the migration of monocytes (P<0.05) and the expression of CXCR4 mRNA and protein (P<0.05) compared with miRNA-126 abundant MP. Conclusion: Microparticles from HUVEC could promote the migration of monocytes. As carriers, microparticles could mediate intercellular signaling.

Key words: Microparticles, micro RNAs, Cell communication

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