北京大学学报(医学版) ›› 2014, Vol. 46 ›› Issue (6): 899-905.
王会娟1,赵兴山1,孙华毅1,陈连凤2,严晓伟2△
WANG Hui-juan1, ZHAO Xing-shan1, SUN Hua-yi1, CHEN Lian-feng2, YAN Xiao-wei2△
摘要: 目的:研究2型糖尿病患者胆固醇外流的功能改变及调节基因三磷酸腺苷结合盒转运子G1(ATPbinding cassette transporter G1,ABCG1)的表达,并探讨肝X受体(liver X receptor,LXR)对ABCG1表达的调节作用。方法: 选取2型糖尿病和健康对照组各30例,抽取外周静脉血40 mL,分离人外周血单核细胞,经巨噬细胞集落刺激因子诱导分化为巨噬细胞。以[3H]胆固醇标记巨噬细胞,用液闪计数法测定胆固醇外流率。实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT PCR)法检测人单核巨噬细胞ABCA1/G1的mRNA表达,Western blot法检测ABCA1/G1的蛋白表达;siRNA法抑制LXRα、LXRβ,观察其对ABCG1mRNA表达的影响;电泳迁移率试验方法(electrophery mobility supershift assay,EMSA)检测LXR与ABCG1启动子区LXR反应元件(liver X receptor element, LXRE)结合的DNA结合蛋白的表达。结果:与健康对照组相比,2型糖尿病患者ABCG1的mRNA及蛋白表达水平与高密度脂蛋白介导的胆固醇外流率显著降低(19.0%±1.2% vs. 12.8%±3.6%, t=2.532, P=0.016),而ABCA1的mRNA及蛋白表达水平与载脂蛋白A1(Apolipoprotein A1, ApoA1)介导的胆固醇外流率差异无统计学意义(12.0%±1.2%vs.10.2%±2.3%, t=1.771, P=0.109)。LXRα、LXRβ的mRNA表达水平以及LXRLXRE DNA结合蛋白的表达差异均无统计学意义(t=1.025,P=0.315;t=-0.531,P=0.600;t=1.483,P=0.164),且LXR的siRNA抑制对ABCG1mRNA的表达也无显著影响(t=2.143,P=0.061)。结论: 2型糖尿病患者巨噬细胞胆固醇外流功能的下降与ABCG1表达下调相关,而ABCG1的表达下调可能不依赖于LXR。
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