人端粒酶催化亚单位(hTERT)反义分子探针细胞摄取动力学与生物学性质

北京大学学报（医学版） ›› 2009, Vol. 41 ›› Issue (4): 437-441.

人端粒酶催化亚单位(hTERT)反义分子探针细胞摄取动力学与生物学性质

王荣福1，2△, 刘萌1, 张春丽1, 闫平1, 于明明1

(1北京大学第一医院核医学科，北京100034； 2北京师范大学放射性药物教育部重点实验室)

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2009-08-18 发布日期:2009-08-18

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2009-08-18 Published:2009-08-18

摘要/Abstract

摘要：

目的：研究人端粒酶催化亚单位(hTERT)反义分子探针(^99mTc-hTERT ASON)在体外靶细胞摄取动力学情况, 以及特异识别靶基因的生物学性质。方法：以双功能螯合剂法, 制备放射性核素^99mTc标记的针对hTERT mRNA的反义分子探针(^99mTc-hTERT ASON)。培养hTERT表达阳性的人肝细胞癌细胞株(HepG2细胞)。观察在有/无脂质体介导下, 细胞对^99mTc-hTERT ASON的摄取动力学情况。阳离子脂质体介导^99mTc-hTERT ASON转染细胞, 逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction, RT-PCR)分析其特异识别靶基因的生物学活性。结果：^99mTc-hTERT ASON的标记率达到(76±5)%(n=5), 放射性化学纯度达到96%, 比活度为1.850×10⁶ Bq/μg。不论脂质体介导与否, ^99mTc-hTERT ASON在不同时相的细胞摄取率均高于对照组(P＜0.05); 脂质体明显提高细胞对^99mTc-hTERT ASON的摄取(P＜0.05); 通过脂质体介导, 细胞对^99mTc-hTERT ASON的摄取高峰值提前至2 h, 并保持稳定水平至3 h。RTPCR结果显示^99mTc-hTERT ASON转染细胞后, hTERT mRNA表达量明显降低。结论：脂质体在体外能有效提高^99mTc-hTERT ASON的细胞摄取率。分子探针^99mTc-hTERT ASON能特异识别靶基因。为进一步开展^99mTc-hTERT ASON体内研究奠定了基础。

关键词: 分子探针, 端粒, 末端转移酶, 脂质体, 细胞, 培养的

王荣福, , 刘萌, 张春丽, 闫平, 于明明. 人端粒酶催化亚单位(hTERT)反义分子探针细胞摄取动力学与生物学性质[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(4): 437-441.

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