摘要: 目的:克隆胸腺细胞发育相关新基因.方法:应用抑制性差减杂交技术(suppression subtractive hybridization, SSH),构建了胸腺基质细胞系cDNA差减杂交文库,结合RACE及RT-PCR进一步克隆并验证新基因的cDNA全长序列.结果:筛选两个不同胸腺基质细胞系的差异表达基因,获得了差异表达的cDNA片段,克隆后挑选阳性克隆进行测序,成功克隆8个新基因片段.对其中两个新基因克隆C55和C91进行Northern杂交分析,mRNA转录体长度分别为1.4 kb及1.5 kb,C55的表达在两种胸腺基质细胞系中存在显著差异.进一步克隆了C55和C91两个新基因的cDNA全长序列,已被GenBank所接受.结论:抑制性差减杂交技术是克隆新基因片段的有效方法;成功克隆8个新基因片段及两个新基因的cDNA全长序列.
[1] | 袁临天,马利沙,刘润园,齐伟,张栌丹,王贵燕,王宇光. 计算机模拟亚甲基蓝与牙龈卟啉单胞菌部分蛋白的分子对接[J]. 北京大学学报(医学版), 2022, 54(1): 23-30. |
[2] | 娄雪,廖莉,李兴珺,王楠,刘爽,崔若玫,徐健. 类风湿关节炎患者外周血TWEAK基因启动子区甲基化状态及其表达[J]. 北京大学学报(医学版), 2021, 53(6): 1020-1025. |
[3] | 曹泽,王乐童,刘振明. 严重急性呼吸综合征冠状病毒2的Spike蛋白点突变后与受体蛋白质及潜在抗病毒药物结合能力的同源建模分析[J]. 北京大学学报(医学版), 2021, 53(1): 150-158. |
[4] | 候越,赵旭彤,谢志颖,袁云,王朝霞. 线粒体DNA 8344 A>G突变导致的MELAS/MERRF/Leigh重叠综合征[J]. 北京大学学报(医学版), 2020, 52(5): 851-855. |
[5] | 王兆年,高文静,王碧琦,曹卫华,吕筠,余灿清,逄增昌,丛黎明,汪华,吴先萍,刘彧,李立明. 成年双生子空腹血糖、糖化血红蛋白与全基因组DNA甲基化的相关性研究[J]. 北京大学学报(医学版), 2020, 52(3): 425-431. |
[6] | 王婷婷,韩影,高芳芳,叶磊,张育军. 环状RNA circ-SOD2对肠上皮屏障和溃疡性结肠炎的作用[J]. 北京大学学报(医学版), 2019, 51(5): 805-812. |
[7] | 王嘉禹,赵美萍. 荧光分析法测定人体血液样品中脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(APE1)的活性[J]. 北京大学学报(医学版), 2019, 51(3): 487-492. |
[8] | 刘洋,高岩,陈学杰,华红. 脱落细胞DNA 定量分析在口腔潜在恶性疾病诊断中的准确性[J]. 北京大学学报(医学版), 2019, 51(1): 16-20. |
[9] | 吴震天,高文静,王碧琦,曹卫华,吕筠,余灿清,逄增昌,丛黎明,汪华,吴先萍,李立明. 成年双生子血压水平与DNA甲基化相关性研究[J]. 北京大学学报(医学版), 2018, 50(3): 387-394. |
[10] | 李昀倩,盛荟,梁磊,赵越,李怀业,白宁,王彤,袁兰,韩鸿宾. 光磁双模态分子探针Gd-DO3A-EA-FITC在脑组织间隙成像分析中的应用[J]. 北京大学学报(医学版), 2018, 50(2): 221-225. |
[11] | 朱燕,石永进,赵玉亮,朱平. 拓扑异构酶抑制剂通过ATM/ATR和NF-κB途径上调乳腺癌细胞MICA/B 的表达[J]. 北京大学学报(医学版), 2018, 50(2): 318-325. |
[12] | 朱华,王风,郭晓轶,李立强,段东斑,刘志博,杨志. 固体靶PET核素碘-124的制备、质控及甲状腺分子显像[J]. 北京大学学报(医学版), 2018, 50(2): 364-367. |
[13] | 瞿经纬,吕肖庆,刘振明,廖媛,孙鹏晖,王蓓,汤帜. 一种基于图塌缩的药物分子检索方法[J]. 北京大学学报(医学版), 2018, 50(2): 368-374. |
[14] | 邓会,马骏凡,景子洋,梁耀先,阿拉塔,刘洋,邱晓彦,王悦. 免疫球蛋白A在人肾小球系膜细胞中的合成与分泌[J]. 北京大学学报(医学版), 2017, 49(6): 948-953. |
[15] | 柳家园,彭翔,宁向辉,李腾,彭双鹤,王江宜,刘圣杰,丁义,蔡林,龚侃. 尿脱落细胞荧光原位杂交检查阳性在尿路上皮癌中的临床价值[J]. 北京大学学报(医学版), 2017, 49(4): 585-589. |
|