北京大学学报(医学版) ›› 2003, Vol. 35 ›› Issue (4): 348-352.

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肝癌中高表达的新基因LAPTM4B对细胞增殖及成瘤性的影响

何静,邵根泽,周柔丽   

  1. (北京大学基础医学院细胞生物学与遗传学系,北京 100083)
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2003-08-18 发布日期:2003-08-18

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2003-08-18 Published:2003-08-18

摘要: 目的:研究在肝细胞癌中高表达的新基因LAPTM4B 对小鼠NIH3T3细胞生物学行为的影响,探讨LAPTM4B基因的生物学功能.方法:构建真核表达质粒pcDNA3-TM4B,利用脂质体稳定转染LAPTM4B cDNA至NIH3T3细胞中,用RT-PCR、Northern和Western杂交法筛选和鉴定转染后LAPTM4B 基因高表达的单克隆细胞株,研究其与细胞增殖相关的生物学特征的变化.结果:与转染空载体的对照组相比,转染了LAPTM4BcDNA的NIH3T3细胞表面发生明显变化,微绒毛的数量和长度增加,多分枝且缠绕成团.转染细胞在纤黏连蛋白、人工基膜和层黏连蛋白基质上的黏附/铺展能力增强.生长曲线显示转染细胞的生长速率增高.流式细胞仪检测显示转染细胞的S期细胞数比未转染细胞显著增多,而G0~G1期细胞数减少.Western杂交显示Cyclin E蛋白在转染细胞中的表达显著增加.转染细胞对血清的依赖性下降并具有成瘤性.结论:LAPTM4B基因能影响细胞增殖的调节,促进NIH3T3细胞的增殖,并使NIH3T3细胞具有成瘤性,在肿瘤发生过程中具有重要的作用.

关键词: 肝肿瘤, 基因, 转染, 细胞增殖

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