造血干细胞来源的树突状细胞负载p53基因诱导对HMCC97肝癌细胞特异性杀伤

北京大学学报（医学版） ›› 2008, Vol. 40 ›› Issue (5): 489-493.

造血干细胞来源的树突状细胞负载p53基因诱导对HMCC97肝癌细胞特异性杀伤

贾军,任军,张红梅,张利旺,郭晓彤

(1.北京大学临床肿瘤学院,北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所内科,北京 100142;2.第四军医大学西京医院肿瘤科;3.广州军区总医院肿瘤科)

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-10-18 发布日期:2008-10-18

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2008-10-18 Published:2008-10-18

摘要/Abstract

摘要： 目的:以p53基因转染CD34+造血干细胞采集物来源的树突状细胞(dendritic cell,DC),诱导DC产生特异性抗肝癌免疫,观察其对表达P53抗原肝癌细胞的杀伤效果.方法:采用化疗和集落刺激因子联合动员肝癌患者外周血造血干细胞,血细胞分离机采集CD34+造血干细胞,白细胞介素(interleukin-4,IL-4)、粒-巨细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating-factor,GM-CSF)联合肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor αTNF-α)刺激CD34+细胞分化为DC.通过脂质体转染的方法将携带人p53基因的质粒pEGFP-C3/p53转染培养7 d的DC,MTT法检测对不同人肝癌细胞HMCC97和HepG2的特异性杀伤效果.结果:经细胞冈子刺激诱导培养的DC具有典型的分枝状突起,高表达CD1a、CD11c、CD80、CD86和HLA-DR分子.转染p53基因后可见到转染DC细胞表达绿色荧光蛋白,免疫荧光染色可见转染p53基因的DC发出红色荧光,而未转染DC无荧光表达.MTT法检测结果表明,p53基因转染后的DC可诱发特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应,杀伤表达P53抗原的HMCC97细胞,p53基因转染组、空载体组和未转染DC组的杀伤率分别为(49.3±4.6)%、(25.4±4.1)%和(24.8±3.8)%,转染组与空载体组和未转染DC组间存在统计学差异(P<0.05).而对于不表达P53抗原的HepG2细胞,转染P53的DC诱导的CTL反应未能产生明显的杀伤作用,p53基因转染组、空载体组和未转染DC组的杀伤率分别为(30.8±4.6)%、(27.3±4.3)%和(28.5±5.1)%,3组间差异无统计学意义(P0.05).结论:p53基因转染CD34+造血干细胞来源的DC可诱导特异性CTL反应杀伤表达P53抗原的肝癌细胞,提示P53可能成为DC细胞免疫治疗的潜在靶点.

关键词: 基因, p53, 造血干细胞, 树突细胞, 肝肿瘤

贾军, 任军, 张红梅, 张利旺, 郭晓彤. 造血干细胞来源的树突状细胞负载p53基因诱导对HMCC97肝癌细胞特异性杀伤[J]. 北京大学学报（医学版）, 2008, 40(5): 489-493.

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