一种改进的大鼠皮层神经元原代培养方法及其性质鉴定

北京大学学报（医学版） ›› 2009, Vol. 41 ›› Issue (2): 212-216.

一种改进的大鼠皮层神经元原代培养方法及其性质鉴定

姜茜, 姜玉武△, 王静敏, 秦炯, 吴希如

(北京大学第一医院儿科, 北京100034)

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2009-04-18 发布日期:2009-04-18

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2009-04-18 Published:2009-04-18

摘要/Abstract

摘要： 目的：对原有大鼠皮层神经元原代培养方法进行改进, 以获得数量更多、纯度更高、体外生长时间更长的神经细胞进行相关实验研究。方法: 使用3种不同成分的液体对培养器皿进行序贯预处理, 分离16~17 d胎龄的Wistar大鼠胎鼠皮层, 采用木瓜蛋白酶化学消化与机械吹打相结合的方法制备单细胞悬液, 经细胞计数后按照不同实验目的进行梯度密度接种。细胞接种当日4~6 h将含有血清的接种培养液换为添加B27的Neurobasal无血清培养基, 培养第3天(DIV3)用终浓度10 μmol/L的阿糖胞苷(cytosine arabinoside, Ara-C)处理24 h抑制胶质细胞增殖, 以后每周半量换液1次。用倒置相差显微镜观察细胞形态, 利用神经元特异性标志物微管相关蛋白2(microtubuleassociated protein 2, MAP2)与细胞核双标记法鉴定培养神经细胞的纯度, 并以免疫荧光法检测突触前、后标记物以评估突触形成情况。结果: 与单纯多聚赖氨酸预处理培养器皿, 胰蛋白酶化学消化法分离细胞及含血清培养基培养的原方法相比, 方法改进以后收获的细胞产量明显增加, 且消化过程对细胞损伤小, 接种后细胞分散均匀, 杂质少, 纯度高, 树突、突触发育正常, 可长期存活。结论: 该方法简便可行, 结果稳定,用该方法培养的大鼠皮层神经元可作为神经元体外培养的良好实验模型。

关键词: 大脑皮质, 神经元, 细胞, 培养的, 木瓜蛋白酶, 免疫组织化学

姜茜, 姜玉武, 王静敏, 秦炯, 吴希如 . 一种改进的大鼠皮层神经元原代培养方法及其性质鉴定[J]. 北京大学学报（医学版）, 2009, 41(2): 212-216.

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[1]	付浩, 申潞艳, 黄冰洋, 马少华. 免疫治疗背景下食管鳞状细胞癌围手术期治疗的临床思考[J]. 北京大学学报（医学版）, 2026, 58(2): 266-271.
[2]	李峥, 吕珑薇, 张晓, 夏丹丹, 张萍, 刘云松, 周永胜. 基于干细胞和生物材料调控的口腔颅颌面骨再生的研究进展[J]. 北京大学学报（医学版）, 2026, 58(2): 272-277.
[3]	张晗, 杨馥嘉, 杨瑞莉. 干细胞功能调控在颅颌面组织再生修复中的研究进展[J]. 北京大学学报（医学版）, 2026, 58(2): 285-289.
[4]	温倩颖, 张丽卿, 秦安霖, 李小峰. 无症状高尿酸血症患者小肠细菌过度生长及炎症细胞因子表达水平[J]. 北京大学学报（医学版）, 2026, 58(2): 313-318.
[5]	殷昊明, 王子杰, 舒帆, 张展奕, 梁会, 张树栋. 肾透明细胞癌FABP6基因长转录本的表达及意义[J]. 北京大学学报（医学版）, 2026, 58(2): 393-398.
[6]	曾立婷, 程凯远, 刘中宁, 李健, 杨静文, 姜婷. miR-488-5p促进大鼠骨髓间充质干细胞成神经、成骨分化及神经化骨再生[J]. 北京大学学报（医学版）, 2026, 58(1): 10-21.
[7]	初吉燕, 李萍, 田竞, 付笛语, 郭琳, 孙蕊, 李亚娣. 黑色素瘤缺乏因子2介导的细胞焦亡通路在特发性炎性肌病患者外周血单个核细胞中的表达[J]. 北京大学学报（医学版）, 2026, 58(1): 175-183.
[8]	赵业, 刁小莉, 熊焰. 细胞转移技术在微量细胞液病理诊断中的应用[J]. 北京大学学报（医学版）, 2026, 58(1): 208-213.
[9]	高若凡, 马天宇, 王润楷, 殷雨辰, 李芮迪, 王丹丹, 夏斌. 细胞膜囊泡递送靶向肿瘤坏死因子-α的小干扰RNA对牙髓干细胞的抗炎作用[J]. 北京大学学报（医学版）, 2026, 58(1): 22-29.
[10]	郑苗, 马欣蓉, 陈昊, 赵恒欣, 张宇, 谭建国, 李和平, 王霄. 大气压放电冷等离子体处理对人牙龈成纤维细胞生物学行为的影响[J]. 北京大学学报（医学版）, 2026, 58(1): 60-67.
[11]	练益瑞, 刘静璇, 赵亮, 赵静, 臧思田, 李玉慧. 抗PM/Scl抗体相关风湿性疾病谱及其在特发性炎性肌病中的免疫学特征[J]. 北京大学学报（医学版）, 2025, 57(6): 1018-1023.
[12]	林文灏, 谢阳, 王芳晴, 王淑盈, 刘香君, 胡凡磊, 贾园. 基于B细胞单细胞转录组测序的干燥综合征分子分型[J]. 北京大学学报（医学版）, 2025, 57(6): 1032-1041.
[13]	丁艳, 王丽芳, 李超然, 卢哲敏, 石连杰. 利妥昔单抗成功治疗类风湿关节炎合并IgG4相关性疾病1例[J]. 北京大学学报（医学版）, 2025, 57(6): 1203-1207.
[14]	欧乾民, 李政诗, 牛露菡, 任倩慧, 刘欣雨, 毛学理, 施松涛. 口腔干细胞的生物学特性与转化研究[J]. 北京大学学报（医学版）, 2025, 57(5): 827-835.
[15]	马保金, 李建华, 桑元华, 于洋, 仇吉川, 邵金龙, 李凯, 刘世岳, 杜密, 商玲玲, 葛少华. 基于微环境和干细胞调控的牙周组织再生关键技术的建立与应用[J]. 北京大学学报（医学版）, 2025, 57(5): 841-846.

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