北京大学学报(医学版) ›› 2009, Vol. 41 ›› Issue (3): 361-367.

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抗synuclein-γ单克隆抗体识别的抗原表位区域的确定

谢玮, 苏亚辉, 刘彩云, 寿成超△

  

  1. (北京大学临床肿瘤学院, 北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所生物化学与分子生物学研究室,恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室, 北京100142)
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2009-06-18 发布日期:2009-06-18

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2009-06-18 Published:2009-06-18

摘要:

目的:确定已获得的多株抗突触蛋白γ(synulcein-γ, SNCG)单克隆抗体识别的抗原表位区域, 为相关后续研究奠定基础。方法: 分别构建谷胱甘肽疏基转移酶(GST)与SNCG不同截短体的表达载体并表达GST-SNCG截短体融合蛋白, 采用ELISA和Western blot检测单抗与不同截短体融合蛋白的反应, 推知不同单抗的抗原识别表位区域。依据推测的抗原识别表位的区域, 构建并表达GST-表位小肽融合蛋白, 并用相应单抗进行ELISA和Western blot检测, 确定单抗的抗原表位区域。结果: 确定了11株SNCG单抗的抗原识别表位区域, 分别是9#、42#和3E4抗体的抗原表位位于SNCG第1到21位氨基酸, 11#和22#抗体的抗原表位位于SNCG第78~92位氨基酸, 1#、14#、18#、31#和36#抗体的抗原表位位于SNCG第93到110位氨基酸, 6C8抗体的抗原表位位于SNCG第111~127位氨基酸。结论: 确定了11株SNCG单抗的抗原识别表位区域, 为SNCG的进一步研究和血清学检测奠定了基础。

关键词: 关键词 癌基因, 抗体, 单克隆, 免疫显性表位, 乳腺肿瘤

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