北京大学学报（医学版） ›› 2013, Vol. 45 ›› Issue (03): 489-492.
谢静1,2，曾强1，郑扬2，廖锋2，徐国恒2，唐朝枢2，耿彬2△
摘要： 目的：建立测定活细胞释放微量硫化氢（hydrogen sulfide，H2S）的简易方法。方法：在细胞培养板盖上方黏附滤膜，细胞释放的硫化氢与滤膜上的醋酸锌反应产生硫化锌，采用亚甲基蓝分光光度法测定并计算细胞释放的硫化氢的量。应用该方法分别检测了HepG2细胞和人脐静脉内皮细胞硫化氢的释放量。结果：HepG2细胞添加L-半胱氨酸以及辅酶磷酸吡哆醛后，继续培养12 h，H2S释放量为(859.39±19.12) nmol/(min·106 cells)；给予胱硫醚-γ-裂解酶抑制剂炔丙基甘氨酸（DL-propargylglycine, PAG）后，H2S产率下降到(341.34±105.90) nmol/(min·106 cells)；胱硫醚-β-合酶抑制剂间羟胺处理后，H2S产率下降到(375.05±174.50) nmol/(min·106 cells)；两种酶抑制剂联合使用后H2S释放量显著抑制，为(204.47±97.14) nmol/(min·106 cells)。人脐静脉内皮细胞也可内源性产生H2S，HUVEC细胞H2S的释放量为(26.23±3.24) nmol/(min·106 cells)，约为HepG2细胞产量的1/30。台盼蓝检测细胞活性大于95%，细胞生长状态良好，表明该方法无细胞毒作用，细胞可根据实验需要继续培养。结论：滤膜吸附法简便易行、实用可靠，可应用于活细胞释放硫化氢的测定。
| [1] | 许颖,次仁央金. 高原红细胞增多症与消化性溃疡出血的关系[J]. 北京大学学报（医学版）, 2022, 54(1): 161-165. |
| [2] | 袁临天,马利沙,刘润园,齐伟,张栌丹,王贵燕,王宇光. 计算机模拟亚甲基蓝与牙龈卟啉单胞菌部分蛋白的分子对接[J]. 北京大学学报（医学版）, 2022, 54(1): 23-30. |
| [3] | 王铮,丁茜,高远,马全诠,张磊,葛兮源,孙玉春,谢秋菲. 氧化锆多孔表面显微形貌对成骨细胞增殖及分化的影响[J]. 北京大学学报（医学版）, 2022, 54(1): 31-39. |
| [4] | 朱小玲,李文静,王宪娥,宋文莉,徐莉,张立,冯向辉,路瑞芳,释栋,孟焕新. 细胞色素B-245α链及胆固醇酯转运蛋白基因多态性与广泛型侵袭性牙周炎易感性的关系[J]. 北京大学学报（医学版）, 2022, 54(1): 18-22. |
| [5] | 范莹莹,刘云,曹烨,谢秋菲. 海马参与雌激素加重咬合干扰致去卵巢大鼠慢性咬肌痛敏[J]. 北京大学学报（医学版）, 2022, 54(1): 40-47. |
| [6] | 周传香,周正,张晔,刘晓筱,高岩. 28例口腔基底样鳞状细胞癌的临床病理分析[J]. 北京大学学报（医学版）, 2022, 54(1): 62-67. |
| [7] | 苏俊琪,宋扬,谢尚. 口腔鳞状细胞癌患者修复重建术后感染的病原学特征及感染风险预测模型的构建[J]. 北京大学学报（医学版）, 2022, 54(1): 68-76. |
| [8] | 杨朵,周心娜,王硕,王小利,袁艳华,杨化兵,耿会珍,彭兵,李子博,李彬,任军. 树突状细胞疫苗特异肿瘤多肽联合树突状细胞体外刺激淋巴细胞功能评估[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(6): 1094-1098. |
| [9] | 田佳宜,张霞,程功,刘庆红,王世阳,何菁. 系统性红斑狼疮患者血清白细胞介素-2受体α水平及其临床意义[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(6): 1083-1087. |
| [10] | 翟莉,邱楠,宋惠. 多中心网状组织细胞增生症1例[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(6): 1183-1187. |
| [11] | 朱正达,高岩,何汶秀,方鑫,刘洋,魏攀,闫志敏,华红. 红色诺卡氏菌细胞壁骨架治疗糜烂型口腔扁平苔藓的疗效及安全性[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(5): 964-969. |
| [12] | 高伟波,石茂静,张海燕,吴春波,朱继红. 显著高铁蛋白血症与噬血细胞性淋巴组织细胞增多症的相互关系[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(5): 921-927. |
| [13] | 田雨,程晓悦,贺慧颖,王国良,马潞林. 肾细胞癌合并尿路瘤栓的临床病理特征: 6例报道及文献回顾[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(5): 928-932. |
| [14] | 蒋青,张雨. 新形势下运动损伤特点及细胞生物治疗的应用前景和挑战[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(5): 828-831. |
| [15] | 敖英芳,曹宸喜. 解析与重塑软骨组织修复再生微环境[J]. 北京大学学报（医学版）, 2021, 53(5): 819-822. |
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