北京大学学报（医学版） ›› 2013, Vol. 45 ›› Issue (03): 489-492.
谢静1,2，曾强1，郑扬2，廖锋2，徐国恒2，唐朝枢2，耿彬2△
摘要： 目的：建立测定活细胞释放微量硫化氢（hydrogen sulfide，H2S）的简易方法。方法：在细胞培养板盖上方黏附滤膜，细胞释放的硫化氢与滤膜上的醋酸锌反应产生硫化锌，采用亚甲基蓝分光光度法测定并计算细胞释放的硫化氢的量。应用该方法分别检测了HepG2细胞和人脐静脉内皮细胞硫化氢的释放量。结果：HepG2细胞添加L-半胱氨酸以及辅酶磷酸吡哆醛后，继续培养12 h，H2S释放量为(859.39±19.12) nmol/(min·106 cells)；给予胱硫醚-γ-裂解酶抑制剂炔丙基甘氨酸（DL-propargylglycine, PAG）后，H2S产率下降到(341.34±105.90) nmol/(min·106 cells)；胱硫醚-β-合酶抑制剂间羟胺处理后，H2S产率下降到(375.05±174.50) nmol/(min·106 cells)；两种酶抑制剂联合使用后H2S释放量显著抑制，为(204.47±97.14) nmol/(min·106 cells)。人脐静脉内皮细胞也可内源性产生H2S，HUVEC细胞H2S的释放量为(26.23±3.24) nmol/(min·106 cells)，约为HepG2细胞产量的1/30。台盼蓝检测细胞活性大于95%，细胞生长状态良好，表明该方法无细胞毒作用，细胞可根据实验需要继续培养。结论：滤膜吸附法简便易行、实用可靠，可应用于活细胞释放硫化氢的测定。
| [1] | 周泽臻,邓绍晖,颜野,张帆,郝一昌,葛力源,张洪宪,王国良,张树栋. 非转移性T3a肾细胞癌患者3年肿瘤特异性生存期预测[J]. 北京大学学报（医学版）, 2024, 56(4): 673-679. |
| [2] | 李晋娜,许丽娜,李敏,宋怡,张静,贾龙斌. 急性脑梗死患者血清BDNF、IL-18、hs-CRP水平与血管性认知障碍的相关性[J]. 北京大学学报（医学版）, 2024, 56(4): 708-714. |
| [3] | 柴晓东,孙子文,李海爽,朱靓怡,刘小旦,刘延涛,裴斐,常青. 髓母细胞瘤分子亚型中CD8+T淋巴细胞浸润的临床病理特点[J]. 北京大学学报（医学版）, 2024, 56(3): 512-518. |
| [4] | 黄会娜,赵静,赵祥格,白自然,李霞,王冠. 乳酸对类风湿关节炎患者外周血CD4+T细胞亚群的调控作用[J]. 北京大学学报（医学版）, 2024, 56(3): 519-525. |
| [5] | 张瑶,郭金鑫,战世佳,洪恩宇,杨慧,贾安娜,常艳,郭永丽,张璇. 富含半胱氨酸和甘氨酸蛋白2在神经母细胞瘤恶性进展中的功能和机制[J]. 北京大学学报（医学版）, 2024, 56(3): 495-504. |
| [6] | 何珊,陈炘,程琦,朱灵江,张培玉,童淑婷,薛静,杜燕. 托法替布通过JAK/STAT3通路抑制肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化[J]. 北京大学学报（医学版）, 2024, 56(3): 505-511. |
| [7] | 蔡祥,王仁东,王世佳,任梓齐,于秋红,李冬果. 胶质母细胞瘤恶性进展中不同细胞亚群的动态轨迹和细胞通讯网络[J]. 北京大学学报（医学版）, 2024, 56(2): 199-206. |
| [8] | 简远志,王菲,尹宁,周若宇,王军波. 基于胚胎干细胞模型的Cry1Ab蛋白发育毒性[J]. 北京大学学报（医学版）, 2024, 56(2): 213-222. |
| [9] | 苏俊琪,王晓颖,孙志强. 舌鳞状细胞癌根治性切除术后患者预后预测列线图的构建与验证[J]. 北京大学学报（医学版）, 2024, 56(1): 120-130. |
| [10] | 潘媛,顾航,肖涵,赵笠君,汤祎熳,葛雯姝. 泛素特异性蛋白酶42调节人脂肪干细胞成骨向分化[J]. 北京大学学报（医学版）, 2024, 56(1): 9-16. |
| [11] | 李建斌,吕梦娜,池强,彭一琳,刘鹏程,吴锐. 干燥综合征患者发生重症新型冠状病毒肺炎的早期预测[J]. 北京大学学报（医学版）, 2023, 55(6): 1007-1012. |
| [12] | 罗靓,李云,王红彦,相晓红,赵静,孙峰,张晓盈,贾汝琳,李春. 抗内皮细胞抗体检测在早期流产中的预测价值[J]. 北京大学学报（医学版）, 2023, 55(6): 1039-1044. |
| [13] | 陈楚云,孙蓬飞,赵静,贾佳,范芳芳,王春燕,李建平,姜一梦,霍勇,张岩. 北京社区人群促红细胞生成素相关因素及其与10年心血管疾病风险的关系[J]. 北京大学学报（医学版）, 2023, 55(6): 1068-1073. |
| [14] | 罗芷筠,吴佳佳,宋优,梅春丽,杜戎. 伴神经精神系统病变的系统性红斑狼疮相关巨噬细胞活化综合征2例[J]. 北京大学学报（医学版）, 2023, 55(6): 1111-1117. |
| [15] | 李辉,彭敏,武娇,张青霞,宁博涵,董颖. p16/Ki67细胞学双染在子宫颈癌前病变及宫颈癌筛查中的应用[J]. 北京大学学报（医学版）, 2023, 55(6): 1144-1148. |
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