北京大学学报(医学版) ›› 2016, Vol. 48 ›› Issue (5): 771-776. doi: 10.3969/j.issn.1671-167X.2016.05.004
王志华1,张伟1,张艳清1,庞春艳2△,王永福1△
WANG Zhi-hua1, ZHANG Wei1, ZHANG Yan-qing1, PANG Chun-yan2Δ,WANG Yong-fu1Δ
摘要:
目的:观察CD40的小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)动物模型MRL/Lpr小鼠细胞因子IFNγ、IL17、IL-4和抗双链DNA(anti-double strand DNA,anti-ds-DNA)抗体表达水平的影响,探讨CD40 siRNA治疗MRL/Lpr小鼠的可能性。方法:16只MRL/Lpr小鼠随机分为对照组、空载体组、CD40-siRNA1组及CD40-siRNA2组,每组4只,将成功构建的CD40 siRNA表达载体尾静脉注射MRL/Lpr小鼠,对照组和空载体组小鼠分别注射等剂量、等比例的磷酸盐缓冲液(PBS)和pGFP-V-RS空载体,每隔1天1次,共6次,14 d处死小鼠,称其脾的质量,组织切片在荧光显微镜下观察小鼠脾是否有CD40 siRNA的表达,注射前及注射后第2、5、8、11和14 天小鼠尾部采血,ELISA法检测4组小鼠血清中IFN-γ、IL-17、IL-4和anti-dsDNA抗体的表达水平变化, RT-PCR法检测小鼠脾组织中CD40 mRNA的表达水平,免疫组织化学法检测小鼠脾组织中CD40蛋白的表达水平。结果:注射后的siRNA表达载体可以在小鼠脾中表达;注射CD40 siRNA组的小鼠脾质量减轻,由对照组(141.88±7.81) mg和空载体组(153.10±7.60) mg降低至CD40-siRNA1组(78.85 ±5.61) mg和CD40-siRNA2组(80.25±4.07) mg,注射前4组小鼠血清中IFN-γ、IL-17、IL-4和anti-dsDNA抗体的(质量)浓度比较,差异无统计学意义;而注射后第2、5和8天 CD40-siRNA1组和CD40-siRNA2组MRL/Lpr小鼠血清中IFN-γ、IL-17和(质量)浓度明显下降,CD40-siRNA1组的IFN-γ的(质量)浓度依次为(118.74±10.32) ng/L(pg/mL)、 (115.24±8.26) ng/L、(113.71±5.02) ng/L ,CD40-siRNA2组依次为(117.83±6.83) ng/L 、(114.07±0.97) ng/L、(112.67±9.66) ng/L; CD40-siRNA1组的IL-17的(质量)浓度依次为(7.05±0.41) ng/L、(6.34±0.76) ng/L、(5.83±0.43) ng/L,CD40-siRNA2组依次为(7.07±0.22) ng/L、(6.35±0.49) ng/L、(6.12±0.80) ng/L;CD40-siRNA1组的anti-dsDNA的浓度依次为(7.51±0.29) ng/L、(6.74±0.45) ng/L、(6.32±0.39) ng/L;CD40-siRNA2组依次为(8.19±0.38) ng/L、(7.14±0.50) ng/L、(6.48±0.29) ng/L。IL-4的(质量)浓度明显升高,CD40-si-RNA1组IL-4的(质量)浓度依次为(26.51±1.81) ng/L、(27.80±1.72) ng/L、(28.08±2.21) ng/L,CD40-siRNA2组依次为(26.28±2.03) ng/L、(28.15±2.95) ng/L、(28.37±1.71) ng/L。 CD40-siRNA1组和CD40-siRNA2组与对照组和空载体组比较差异有统计学意义(P<0.05), 注射后第11和14天 CD40siRNA1组和CD40-siRNA2组中这4个指标的(质量)浓度逐渐恢复至对照组和空载体组的(质量)浓度水平,IFN-γ、 IL-17、IL-4的(质量)浓度4组小鼠比较,差异无统计学意义,注射后第11天 CD40-siRNA1组和CD40-siRNA2组anti-dsDNA抗体的水平尽管与对照组和空载体组比较有所提高,4组比较差异有统计学意义(P<0.05),而注射后第14天 anti-dsDNA抗体的水平4组小鼠比较,差异无统计学意义。注射后第14天 CD40-siRNA1组和CD40-siRNA2组 MRL/Lpr小鼠脾组织中CD40 mRNA和蛋白的表达水平明显低于对照组和空载体组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论: MRL/Lpr小鼠注射CD40 siRNA载体后,血清中IFN-γ、IL17和anti-dsDNA抗体水平降低,IL-4的浓度升高,CD40 mRNA和蛋白的表达水平下降,说明CD40 siRNA抑制其mRNA和蛋白后,MRL/Lpr小鼠炎症反应减轻,疾病活动度下降,提示其对SLE动物模型MRL/Lpr小鼠有治疗作用。
中图分类号:
[1] | 田佳宜,张霞,程功,刘庆红,王世阳,何菁. 系统性红斑狼疮患者血清白细胞介素-2受体α水平及其临床意义[J]. 北京大学学报(医学版), 2021, 53(6): 1083-1087. |
[2] | 娄雪,廖莉,李兴珺,王楠,刘爽,崔若玫,徐健. 类风湿关节炎患者外周血TWEAK基因启动子区甲基化状态及其表达[J]. 北京大学学报(医学版), 2021, 53(6): 1020-1025. |
[3] | 贾睿璇,姜尚伟,赵琳,杨丽萍. Cyp4v3基因敲除小鼠模型的表型分析[J]. 北京大学学报(医学版), 2021, 53(6): 1099-1106. |
[4] | 邹健梅,武丽君,罗采南,石亚妹,吴雪. 血清25-羟维生素D与系统性红斑狼疮活动的关系[J]. 北京大学学报(医学版), 2021, 53(5): 938-941. |
[5] | 李正芳,吴雪,武丽君,罗采南,石亚妹,钟岩,陈晓梅,孟新艳. Rhupus综合征的临床特点[J]. 北京大学学报(医学版), 2021, 53(5): 933-937. |
[6] | 马向波,张学武,贾汝琳,高颖,刘洪江,刘玉芳,李英妮. 外周血淋巴细胞亚群检测在系统性硬化症治疗中的应用[J]. 北京大学学报(医学版), 2021, 53(4): 721-727. |
[7] | 朱忆颖,闵赛南,俞光岩. 局部注射环孢素A对非肥胖糖尿病小鼠下颌下腺分泌功能及炎症的影响[J]. 北京大学学报(医学版), 2021, 53(4): 750-757. |
[8] | 夏芳芳,鲁芙爱,吕慧敏,杨国安,刘媛. 系统性红斑狼疮伴间质性肺炎的临床特点及相关因素分析[J]. 北京大学学报(医学版), 2021, 53(2): 266-272. |
[9] | 赵静,孙峰,李云,赵晓珍,徐丹,李英妮,李玉慧,孙晓麟. 抗α-1C微管蛋白抗体在系统性硬化症中的表达及临床意义[J]. 北京大学学报(医学版), 2020, 52(6): 1009-1013. |
[10] | 郭倩, 马晓旭, 高辉, 石连杰, 钟昱超, 谢琳峰, 邵苗, 张学武. Semaphorin 3A在系统性红斑狼疮合并血小板减少患者中的水平及意义[J]. 北京大学学报(医学版), 2020, 52(5): 892-896. |
[11] | 王晓,贺丹,李文婷,阿迪拉·斯依提,韩蕊,董颖. 144例维吾尔族与汉族女性子宫内膜癌微小RNA表达特点及临床意义[J]. 北京大学学报(医学版), 2020, 52(3): 570-577. |
[12] | 朱梅青,崔蓉. 高效液相色谱法测定小鼠血浆中苯并三唑类紫外线吸收剂UV-327和UV-328[J]. 北京大学学报(医学版), 2020, 52(3): 591-596. |
[13] | 孙奎霞,闫存玲,李志艳,刘平,张伟,何群. 前列腺特异性抗原同源异构体2及其衍生指标在预测前列腺癌病理分级中的价值[J]. 北京大学学报(医学版), 2020, 52(2): 234-239. |
[14] | 耿研,李伯睿,张卓莉. 系统性红斑狼疮患者有症状关节病变的肌肉骨骼超声特点[J]. 北京大学学报(医学版), 2020, 52(1): 163-168. |
[15] | 李英妮,相晓红,赵静,李云,孙峰,王红彦,贾汝琳,胡凡磊. 抗类瓜氨酸化抗体在系统性红斑狼疮中的意义[J]. 北京大学学报(医学版), 2019, 51(6): 1019-1024. |
|