抗人卵巢癌抗体可变区cDNA的克隆与ScFv的构建和表达及放射免疫显像

摘要/Abstract

摘要： 目的:为研究小分子抗体作为导向载体的作用,制备抗人卵巢癌单克隆抗体COC183B2的单链抗体(single chain Fv,ScFv),并进行放射免疫显像(radioimmunoimaging,RⅡ).方法:利用PCR技术从COC183B2杂交瘤细胞中扩增COC183B2重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),并将其克隆入高效表达载体pTHA90中.重组子转化大肠杆菌TOP10,IPTG诱导表达ScFv融合蛋白,经改进氯化亚锡法进行99mTc标记,在卵巢癌裸鼠皮下瘤模型上进行RⅡ.结果:(1)ScFv融合蛋白以包涵体形式获高效表达;(2)改进氯化亚锡法成功进行小分子抗体ScFv 99mTc的标记,标记率达98%;(3)应用99mTc标记ScFv融合蛋白进行RⅡ,肿瘤显像早,图像清晰.结论:应用单链抗体ScFv可改善RⅡ.

关键词: 抗体, 单克隆, 抗体, 肿瘤, 卵巢肿瘤/放射性核素成象, DNA, 环状

刘广芝, 冯捷, 周萍, 黄华梁, 钱和年, 成夜霞, 付天云, 叶雪. 抗人卵巢癌抗体可变区cDNA的克隆与ScFv的构建和表达及放射免疫显像[J]. 北京大学学报（医学版）, 2001, 33(4): 362-365.

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