摘要：

目的：携带癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）基因的重组人腺相关病毒（reconstructive human adenoassociation virus, rh-AAV）感染树突状细胞（dendritic cell, DC）诱导获得抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic lymphocyte,CTL)，体外检测其对CD44⁺CD24^-/low乳腺癌干细胞的杀伤效果。方法：分离供者外周血单个核细胞，以细胞因子白介素-4（interleukin-4,IL-4）、粒细胞-巨噬细胞克隆刺激因子（granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF）和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)诱导培养获得DC，细胞因子白介素-2(interleukin-2,IL-2),刺激培养获得T淋巴细胞。含CEA基因的rh-AAV感染培养DC，诱导成熟后将DC和T细胞混合培养获得CTL细胞。流式分选MCF-7和MA-MDB-231细胞系中CD44⁺CD24^-/low乳腺癌干细胞，MTT法检测CTL细胞对CD44⁺CD24^-/low乳腺癌干细胞的杀伤效果。结果：MCF-7和MDA-MB-231中CD44⁺/CD24^-/low亚群比例分别为5.1%和76.3%。CEA基因转染DC诱导的CTL细胞对表达CEA抗原的MCF-7杀伤率为46.5％±15.0%,与未转染组相比，差异有统计学意义（P=0.009）；对MCF-7细胞中分选的CD44⁺CD24^-/low乳腺癌干细胞的杀伤率为44.7％±28.2%，明显高于未转染组。对非乳腺癌干细胞杀伤率为50.6％±22.2%，与未转染组相比，差异有统计学意义（P=0.05）。在不表达CEA基因的MDA-MB-231乳腺癌细胞，CEA转染诱导的CTL细胞对未分选细胞、分选的CD44⁺/CD24^-/low亚群和非干细胞亚群的杀伤率与未转染的对照组相比，差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：携带CEA基因rh-AAV转染DC诱导产生的抗原特异性CTL细胞可杀伤表达CEA的乳腺癌细胞，对CD44⁺CD24^-/low乳腺癌干细胞也具有一定的杀伤活性，提示免疫治疗可能是治疗乳腺癌干细胞潜在有效的手段。

关键词: 乳腺肿瘤, 肿瘤干细胞, 树突细胞, 免疫疗法