北京大学学报(医学版) ›› 2003, Vol. 35 ›› Issue (4): 402-407.
唐志伟,张波,徐文怀,赵瑗君,侯琳
摘要: 目的: 研究TRAP基因在人肿瘤组织中的表达及其与人端粒酶逆转录酶(hTERT)的作用相关性,探讨其在人肿瘤发生中的作用.方法: 通过原核表达TRAP蛋白免疫新西兰白兔,制备特异性多克隆抗体;免疫组化检测TRAP及hTERT在人肿瘤组织中的表达;通过构建TRAP真核表达载体、基因转染,观察TRAP对细胞hTERT转录、端粒酶活性和癌细胞生长及成瘤性的影响.结果:通过大肠杆菌表达的TRAP蛋白免疫、制备多克隆抗体,经Western blot鉴定与TRAP具有特异结合性;免疫组化显示247例恶性肿瘤中有213例TRAP阳性,表达率为86.2 %,而在所有癌旁组织中TRAP为阴性.另外,交界性及癌前病变与良性病变组织中TRAP表达差异也有显著性.进一步检测卵巢生发上皮肿瘤、乳腺癌、肝癌及中枢神经系统肿瘤组织hTERT表达,显示hTERT与TRAP表达的结果相一致.TRAP正义转染使hTERT及端粒酶活性升高,细胞增殖加快;而反义转染时,两者均下降,细胞增殖受抑.裸鼠成瘤性实验表明:正义TRAP使癌细胞成瘤性增强,而反义则抑制移植瘤的生长.结论: TRAP表达存在于人癌组织及部分癌前病变,与癌细胞恶性表型相关,并与hTERT表达一致.TRAP基因参与对端粒酶的调节作用,可能与人肿瘤发生有关.
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