北京大学学报(医学版) ›› 2005, Vol. 37 ›› Issue (3): 297-301.

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肿瘤及胚胎组织特异表达蛋白65与低密度脂蛋白受体相关蛋白关联蛋白的结合

靳更林,张建芝,苏荣,刘晓颖,吴健,孟麟,寿成超   

  1. (北京大学临床肿瘤学院,北京肿瘤医院,北京 100034)
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2005-06-18 发布日期:2005-06-18

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2005-06-18 Published:2005-06-18

摘要: 目的:寻找与肿瘤及胚胎组织特异表达蛋白65(cancer and embryo expression protein 65,CEP65)相互结合的蛋白分子,为研究CEP65在肿瘤发生中的作用机制提供线索.方法:以CEP65为诱饵蛋白,通过酵母双杂交方法,筛选人胚胎组织cDNA表达文库.将获得的阳性克隆cDNA片段分别克隆到原核和哺乳细胞表达质粒,通过GST pull-down和免疫共沉淀对相互作用蛋白作进一步验证.结果:筛选到能与CEP65相互结合的低密度脂蛋白受体相关蛋白产关联蛋白(low density lipoprotein receptor-related protein-associated protein 1,RAP).将分别在原核和哺乳细胞中表达的RAP与CEP65进行GST pull-down实验,结果显示,原核表达的GST-RAP可以与His-CEP65相互结合,而在哺乳细胞共表达的GST-CEP65和Myc-RAP也能相互结合.结论:RAP可以和CEP65相结合,CEP65有可能通过与RAP相互作用,在肿瘤的浸润、转移及增生中发挥其功能.

关键词: 抗原, 肿瘤, 肿瘤及胚胎组织特异表达蛋白65(CEP65), LDL受体相关蛋白关联蛋白质

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