北京大学学报(医学版) ›› 2005, Vol. 37 ›› Issue (4): 406-409.

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大鼠脑片的器官型培养及其中神经元的发育规律

郑梅,樊东升,张俊,宋德懋,范少光   

  1. (1.北京大学第三医院神经内科,北京 100083;2.北京大学基础医学院生理学与病理生理学系)
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2005-08-18 发布日期:2005-08-18

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2005-08-18 Published:2005-08-18

摘要: 目的:建立器官型脑片培养的方法,证明体外培养到一定时间神经元发育成熟,可在此基础上制作神经系统变性疾病模型.方法:取出生24 h内SD大鼠的额叶皮质作器官型培养.取培养7~14 d内每天的及培养第3周、4周和8周时的脑片,固定、脱水、切片后行Nissl和抗神经丝重链(NFH)免疫组化染色.同时用正常生长大鼠的脑片作对照,观察与培养脑片染色结果的异同.结果:Nissl染色结果显示,培养脑片中的锥体细胞体积逐渐增大、染色变浅,1~4周内皮质分层清晰.抗NFH免疫组化染色显示,培养至第10天时,位于第V层的锥体细胞着色,第12天以后Ⅲ层和V层均着色.对照组第5天时V层着色,3周以后Ⅲ层和V层都着色.对位于Ml区的第V层锥体细胞进行计数,从培养第12天开始至2个月时,神经元数目保持恒定.结论:器官型脑片培养适用于出生后神经元发育的研究,并可用于制作神经系统变性疾病的体外模型.

关键词: 器官培养, 脑, 神经元, 疾病模型, 动物

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