北京大学学报(医学版) ›› 2012, Vol. 44 ›› Issue (3): 469-474.
高丽1△,Robert Gyurko2,Thomas Van Dyke3
摘要: 目的:构建髓细胞选择性表达人类趋化因子受体1(chemokine receptor-like 1, CMKLR1或human chemerin receptor 23,hChemR23)的转基因小鼠,检测其在小鼠腹膜炎和牙周炎的炎症反应中的抑制作用。方法:将全长hChemR23的cDNA和启动子hCD11b克隆到pcDNA3质粒,转基因片段(2.9 kb)经纯化后由波士顿大学转基因/基因敲除小鼠中心构建转基因小鼠。通过实时定量PCR检测亲代hChemR23转基因的拷贝数和mRNA水平。hChemR23转基因雄性小鼠和野生型FVB雌性小鼠杂交繁殖产生杂合型转基因小鼠后代。采用PCR方法检测子代小鼠基因组DNA明确基因型。转基因小鼠经腹腔注射1 mL酵母多糖A溶液(1 g/L)构建急性腹膜炎模型,灌洗细胞经PE标记的抗鼠F4/80和FITC标记的抗鼠Ly6G染色后,采用FACSort方法检测。在小鼠上颌第一磨牙结扎9-0丝线诱导转基因小鼠牙周炎模型,测量釉牙骨质界距牙槽骨骨嵴顶的距离(cementoenamel junction to the alveolar bone crest,CEJ-ABC)检测牙槽骨的丧失。所有实验数据采用配对t检验和方差分析方法进行统计学分析。结果:4个F1亲代小鼠携带hChemR23基因。hChemR23转基因小鼠腹膜炎腹腔灌洗液中中性粒细胞的含量比野生型减少了56%。在丝线结扎诱导的小鼠牙周炎模型中,hChemR23转基因小鼠比野生型小鼠的牙槽骨骨吸收显著降低(P<0.05)。结论:hChemR23转基因小鼠过表达hChemR23 mRNA水平,在急性腹膜炎和丝线结扎诱导的牙周炎模型中抑制炎症反应。
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