北京大学学报(医学版) ›› 2014, Vol. 46 ›› Issue (6): 889-893.
殷倩1,2,鲁海燕2,3,杨承志2,田爱炬2,杨秋香 2,3,张幼怡2,郑晓晖3△,李子健2△,郑小璞1△
YIN Qian1,2, LU Hai-yan2,3, YANG Cheng-zhi2, TIAN Ai-ju2, YANG Qiu-xiang2,3, ZHANG You-yi2, ZHENG Xiao-hui3△, LI Zi-jian2△, ZHENG Xiao-pu1△
摘要: 目的:应用非选择性β肾上腺素受体激动剂——异丙基肾上腺素(isoproterenol,ISO)连续皮下注射7 d诱导心脏纤维化模型,并观察此模型中炎症调控核转录因子NF-κB的变化。方法:采用10周龄体重为280~320 g 的SD大鼠,ISO以0.25 mg/(kg·d)剂量连续背部皮下注射7 d诱导心脏纤维化模型。心脏组织切片进行苦味酸-天狼猩红染色观察纤维化,以胶原容量分数进行胶原面积定量统计。应用real-time PCR法检测心脏组织中Ⅰ型/Ⅲ型胶原及炎症因子IL-6的mRNA表达。组织切片进行HE染色观察心脏病理变化。免疫组织化学方法检测心脏组织中NF-κB在细胞内的定位, Western blot法检测心脏组织中磷酸化的NF-κB水平。结果:ISO诱导的心脏纤维化模型中天狼猩红染色面积明显大于对照(control,CON)组,且ISO组的胶原容积分数显著高于CON组(12.01±1.64 vs. 0.95±0.06, P<0.001);ISO组Ⅰ、Ⅲ型胶原的mRNA表达显著高于CON组(Ⅰ型胶原:10.51±0.47 vs. 0.98±0.02,P<0.001;Ⅲ型胶原:9.58±1.33 vs. 1.02±0.02, P<0.001)。ISO组心脏组织中可见细胞核增多、聚集,提示可能炎症细胞浸润,且炎症因子IL-6的mRNA表达水平明显增加(1.64±0.18 vs. 1.04±0.07, P <0.01)。CON组NF-κB主要定位于心肌细胞胞浆中,心肌细胞核中未见NF-κB的定位; ISO组出现明显NF-κB核转位活化,心肌细胞胞浆中的NF-κB较CON组减少,心肌细胞核及间质细胞核均可见明显的NF-κB定位,同时,ISO组心脏组织磷酸化NF-κB的水平明显高于CON组(10.83±2.05 vs.1.05±0.27, P<0.001)。结论:连续7 d皮下注射ISO可成功诱导心脏纤维化模型,且此模型心脏组织中活化的核转录因子NF-κB增加。
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