趋化因子受体CXCR4反义RNA重组表达载体的构建及其在真核细胞中的表达

摘要/Abstract

摘要： 目的:构建趋化因子受体CXCR4反义 RNA真核表达载体并获取重组假病毒颗粒以用于抗HIV-1研究.方法:用RT-PCR法从健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中获得目的基因,并以正、反两个方向定向插入到逆转录病毒载体pLXSN.重组载体用脂质体转染剂 (lipofectAMINE)转染PA317包装细胞,抗G418克隆的细胞上清经逆转录后用荧光定量PCR(fluorogenic-quantitative PCR,FQ-PCR)测定假病毒滴度,进一步感染NIH/3T3 细胞. 结果: CXCR4正、反义RNA 的真核表达载体,经PA317细胞包装形成的假病毒颗粒已成功地感染NIH/3T3细胞,目的基因在该细胞中得到整合与表达.结论:从PBMCs中获得的目的基因通过逆转录病毒载体可转移至真核细胞中并得到表达,为进一步研究CXCR4反义RNA的抗HIV-1作用奠定了基础.

关键词: 趋化因子/代谢, 遗传载体, 真核细胞, 转染, RNA, 反义/代谢

邢卉春, 徐小元, 王勤环, 于敏, 公伟波, 斯崇文, 邵一鸣. 趋化因子受体CXCR4反义RNA重组表达载体的构建及其在真核细胞中的表达[J]. 北京大学学报（医学版）, 2002, 34(2): 155-158.

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