北京大学学报(医学版) ›› 2006, Vol. 38 ›› Issue (6): 653-656.

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利用NF-κB转录活性萤光素酶报告系统检测白细胞介素1及白细胞介素1受体拮抗剂的生物活性

张颖妹,王应,徐茜梅,吕冰峰,马大龙   

  1. ^A北京大学基础医学院免疫学系,北京,100083^B北京大学^C1447^D1%^A北京大学人类疾病基因研究中心,北京,100083^B北京大学^C1447^D2%^A北京大学基础医学院免疫学系,北京,100083;北京大学人类疾病基因研究中心,北京,100083^B北京大学^C1447^D3
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2006-12-18 发布日期:2006-12-18

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2006-12-18 Published:2006-12-18

摘要: 目的:利用NF-κB转录活性萤光素酶报告系统,建立新的白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)和白细胞介素1受体拮抗剂(interleukin-1 receptor antagonist,IL-1ra)生物学活性的检测方法.方法:运用萤光素酶转录报告系统,选用小鼠胸腺瘤细胞系EL4细胞(EL4的某些亚克隆细胞表面具有高密度IL-1受体表达),以pNF-κB-luc质粒和内对照pRL-TK质粒共转染,并加入IL-1β激活,以双萤光素酶报告基因检测系统检测IL-1β及其抑制剂IL-1ra的生物学活性.结果:这种方法检测到IL-1β激活NF-κB报告基因表达萤光素酶,并且这种激活可被IL-1ra所抑制,实验重复性好.IL-1β在5 μg/L为激活NF-κB报告基因表达萤光素酶的最佳浓度,并可被IL-1ra 50 μg/L最大抑制.结论:这种检测方法的建立为今后对IL-1β和IL-1ra的生物学活性检测提供了新的途径.

关键词: NF-κB, 白细胞介素1, 受体, 白细胞介素1, 萤光素酶

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