MDA-MB-453细胞中分离CD44+/CD24-/low和SP细胞及其Wnt和Notch通路状态分析

北京大学学报（医学版） ›› 2008, Vol. 40 ›› Issue (5): 471-475.

MDA-MB-453细胞中分离CD44⁺/CD24^-/low和SP细胞及其Wnt和Notch通路状态分析

李昕,任军

(北京大学临床肿瘤学院,北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所内科,北京 100142)

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-10-18 发布日期:2008-10-18

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2008-10-18 Published:2008-10-18

摘要/Abstract

摘要： 目的:通过分离人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)过表达乳腺癌细胞MDA-MB-453中的CD44+/CD24-/low和SP(side population)细胞亚群,探索其干细胞表型,同时分析其SP细胞亚群与wnt和Notch信号传导通路中的关键蛋白([β-catenin和Notch-1)基因扩增的关系,研究其SP细胞亚群与HER2和人类表皮生长因子3(human epidermal growth factor 3,HER3)基因扩增的相关性.方法:应用流式细胞技术,检测HER2过表达乳腺癌细胞MDA-MB-453和HER2阴性细胞MCF-7是否存在CD44+/CD24-/low细胞亚群和SP细胞亚群.应用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)的方法检测MDA-MB-453细胞中母β-catenin和Notch-1的基因扩增情况,粗略比较在MDA-MB-453细胞及其SP细胞亚群中β-catenin,Notch-1,HER2和HER3蛋白基因扩增量的差异.结果:MDA-MB-453细胞系未检测到CDM44+/CD24-/low细胞亚群,但可检测出SP细胞亚群.在MDA-MB-453细胞和MCF-7细胞均可扩增到β-catenin和Notch-1.β-catenin和Notch-1的基因扩增在MDA-MB-453细胞中低于其SP细胞哑群;然而,HER2和HER3的基因扩增在两个细胞亚群中是类似的.结论:SP细胞能够富集MDA-MB-453乳腺癌干细胞.wnt和Notch信号通路在MDA-MB-453细胞中处于开放激活状态,这些信号传导通路可能与MDA-MB-453乳腺癌干细胞的维持和活性相关.

关键词: 乳腺肿瘤, 受体, 表皮生长因子, 多潜能干细胞, 基因扩增, 受体, Notch1

李昕, 任军. MDA-MB-453细胞中分离CD44⁺/CD24^-/low和SP细胞及其Wnt和Notch通路状态分析[J]. 北京大学学报（医学版）, 2008, 40(5): 471-475.

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