北京大学学报(医学版) ›› 2011, Vol. 43 ›› Issue (2): 179-182.

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NF-κB信号通路的阻断对皮肤鳞癌SCL-1细胞凋亡的影响

夏永华1,刘冬1,张彩凤2,付丹丹1,李敏1,李占国1,田中伟1△   

  1. (新乡医学院第一附属医院1.皮肤性病科,2.消化科,卫辉453100 )
  • 收稿日期:2010-03-08 修回日期:2010-09-26 出版日期:2011-04-18 发布日期:2011-04-18
  • 通讯作者: 田中伟

  • Received:2010-03-08 Revised:2010-09-26 Online:2011-04-18 Published:2011-04-18

摘要:

目的:利用siRNA技术抑制核因子-kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)亚单位p65基因的表达,研究其对p65表达的抑制作用,并探讨其对皮肤鳞癌SCL-1细胞凋亡的影响。方法:将终浓度为50 nmol/L的p65 siRNA转染皮肤鳞癌SCL-1细胞,通过RT-PCR检测p65 mRNA的表达;利用Western blotting检测p65、bcl-2和bax蛋白表达,利用Caspase-Glo®-3/7,8和9检测试剂盒检测caspase-3/9的活性;最后通过流式细胞术检测细胞凋亡。结果:p65 siRNA转染SCL-1细胞后的48 h,p65 mRNA的表达水平最低,与0 h相比, 差异有统计学意义(0.23±0.10 vs. 0.66±0.05, P<0.05);转染48 h后,p65和bcl-2蛋白表达水平下调,而促凋亡蛋白bax的表达上升,进一步caspase-3/9的活性也显著升高。流式细胞术结果表明,p65 siRNA能明显诱导SCL-1细胞发生凋亡,其早期凋亡的比率为20.28%±1.87%,显著高于未处理组和对照siRNA组(凋亡率分别为9.13%±1.51%和9.37%±1.38%,F=47.532,P<0.01)。结论:p65 siRNA能够阻断皮肤鳞癌细胞中NF-κB信号通路,并下调抑凋亡蛋白bcl-2的表达,上调促凋亡蛋白bax的表达以及提高caspase的活性,提示NF-κB信号通路有望成为皮肤鳞癌基因治疗的分子靶点。

关键词: 皮肤肿瘤, 癌, 鳞状细胞, NF-κB, RNA, 小分子干扰, 细胞凋亡

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